pAb de lapin anti-SH2B1 pour IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q9NRF2

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de SH2B1

• La protéine adaptatrice SH2B1 (SH2B1, également appelée PSM) est une protéine adaptatrice intracellulaire qui n'a pas d'activité enzymatique intrinsèque, mais contient des domaines SH2 et PH, ce qui permet son recrutement auprès des récepteurs et des adaptateurs contenant des phosphotyrosines.
• Il agit comme médiateur de signalisation essentiel pour de nombreux récepteurs tyrosine kinases (RTK) et récepteurs de cytokines associés à Janus kinase (JAK), notamment ceux de l'insuline, du facteur de croissance analogue à l'insuline 1 (IGF1), du facteur de croissance nerveuse (NGF), du facteur neurotrophique dérivé du cerveau (BDNF), du facteur neurotrophique dérivé de la lignée gliale (GDNF), du facteur de croissance dérivé des plaquettes (PDGF) et des facteurs de croissance des fibroblastes (FGF).
• Dans la signalisation de l'hormone de croissance (GH) et de la leptine, SH2B1 se lie à JAK2 autophosphorylé et augmente l'activité kinase de JAK2, favorisant l'activation des voies de signalisation en aval telles que PI3K-Akt via la phosphorylation de IRS1/2.
• Les isoformes de SH2B1, générées par épissage alternatif, peuvent moduler la signalisation de manière différentielle ; par exemple, elles peuvent présenter des rôles distincts dans la mitogenèse induite par IGF1 et PDGF.
• Au niveau sous-cellulaire, SH2B1 est localisé dans le cytoplasme, la membrane cellulaire et le noyau, ce qui correspond à son rôle dynamique dans la transduction du signal.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la phosphorylation sur des résidus tyrosine et sérine/thréonine (par exemple par JAK2), qui créent des sites d'ancrage pour d'autres protéines de signalisation, ainsi que la méthylation.
• SH2B1 est largement exprimé dans tous les tissus, avec les niveaux les plus élevés détectés dans le muscle squelettique et l'ovaire, ce qui reflète ses fonctions régulatrices étendues.

Conseils expérimentaux et techniques

• Pour IHC-P, pensez à optimiser la récupération d'antigène et la dilution de l'anticorps primaire en utilisant des tissus témoins positifs comme le muscle squelettique ou l'ovaire, où SH2B1 est fortement exprimé.
• Pour IF/ICC, les conditions de fixation et de perméabilisation doivent être déterminées expérimentalement ; l'anticorps peut détecter les pools membranaires, cytoplasmiques et/ou nucléaires en fonction du type cellulaire et de la stimulation.
• Étant donné la nature polyclonale de cet anticorps, il est conseillé de réaliser une expérience de titration et de valider la spécificité en utilisant des contrôles de knock-down ou de knock-out pour prendre en compte la variabilité potentielle d'un lot à l'autre.
• ELISA peut être utilisée pour détecter la SH2B1 endogène ; cependant, les normes appropriées et les protocoles de préparation d'échantillons doivent être optimisés pour le format de dosage spécifique.
• Cet anticorps est prédit pour avoir une réactivité croisée avec la SH2B1 de souris et de rat sur la base de l'homologie de séquence, mais une validation expérimentale chez ces espèces est recommandée.

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