SARS-CoV-2 ORF3A Lapin pAb - P0DTC3

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la protéine ORF3A du SARS-CoV-2

• La protéine ORF3a est une protéine accessoire du SARS-CoV-2, également connue sous le nom de Protéine 3a, Protéine U274 ou Protéine X1.
• Elle joue un rôle clé dans l'égress viral en facilitant le trafic lysosomal des virions (PubMed:33157038, PubMed:33422265). Références associées : PMID:33157038 PMID:33422265
• ORF3a forme des canaux ioniques homotétramériques (viroporines) dans les membranes endosomales et lysosomales, induisant potentiellement une déacidification lysosomale pour favoriser la libération sûre du virus (PubMed:33157038, PubMed:33422265, PubMed:34158638). Références associées : PMID:33157038 PMID:33422265 PMID:34158638
• La protéine perturbe l'autophagie de l'hôte en se liant à VPS39 sur les endosomes tardifs, ce qui bloque la fusion autophagosome-lysosome et la formation d'autolysosomes (PubMed:33422265). Références associées : PMID:33422265
• ORF3a induit la réticulophagie dépendante de RETREG1/FAM134B en interagissant avec HMGB1, renforçant l'association HMGB1-BECN1 et provoquant un stress du RE et des réponses pro-inflammatoires (PubMed:35239449). Références associées : PMID:35239449
• Au niveau subcellulaire, ORF3a se localise au virion, à la membrane de la cellule hôte, à la membrane du réticulum endoplasmique, sous forme sécrétée, dans le cytoplasme, les endosomes et les lysosomes.
• Les mots-clés biologiques clés incluent glycoprotéine, interaction hôte-virus, canal ionique, transport ionique, activation de l'autophagie de l'hôte et activité viroporine.
• La protéine a un poids moléculaire calculé d'environ 31,1 kDa (UniProt), cohérent avec les 31 kDa observés attendus pour cet anticorps.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique couvrant les acides aminés 100-200 de la protéine ORF3a ; les épitopes de liaison de l'anticorps peuvent être concentrés dans cette région, ce qui doit être pris en compte lors de la conception des expériences ou de l'interprétation des résultats.
• Pour le Western blot, la bande attendue pour ORF3a est d'environ 31 kDa ; validez la spécificité en utilisant des lysats de cellules infectées par le SARS-CoV-2 ou des systèmes surexprimant ORF3a.
• Dans les applications ELISA, confirmez les conditions optimales de coating et la dilution de l'anticorps en utilisant la protéine ORF3a recombinante ou des contrôles positifs définis.
• En tant qu'anticorps polyclonal, la cohérence d'un lot à l'autre peut varier ; il est conseillé de qualifier chaque nouveau lot dans l'application prévue avant une utilisation à grande échelle.
• L'anticorps est expédié sur glace humide ; à réception, aliquotez et stockez à -20°C (ou selon les recommandations du fabricant) pour maintenir la stabilité.

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