Anticorps polyclonal RING1A (Lapin) pour WB, IHC-P, ELISA - Q06587

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de RING1A

• RING1A, également connue sous le nom de RNF1 ou protéine RING1 du complexe Polycomb, est une ligase E3 ubiquitine-protéine qui joue un rôle central dans la modification des histones et la régulation épigénétique des gènes.
• Elle constitue l'une des ligases E3 médiant la monoubiquitination de l'histone H2A au niveau de la Lys-119, une modification qui sert de marqueur spécifique pour la répression transcriptionnelle et est essentielle pour l'inactivation du chromosome X chez les mammifères femelles.
• RING1A est un composant central du complexe répresseur Polycomb 1 (PRC1), qui maintient l'état silencieux de régulateurs clés du développement tels que les gènes Hox via le remodelage de la chromatine et des changements héréditaires dans l'expression des gènes.
• Comparée à son paralogue RNF2/RING2, RING1A présente une activité intrinsèque de ligase E3 plus faible et est considérée comme fonctionnant principalement comme un modulateur ou un facteur accessoire pour l'ubiquitination des histones médiée par RNF2/RING2.
• Plusieurs isoformes existent en raison d'épissages alternatifs, et la protéine contient un domaine de type doigt de zinc RING essentiel à sa fonction de ligase ubiquitine, ainsi que des motifs pour la liaison aux métaux et la régulation de la chromatine.
• RING1A se localise dans le noyau et est enrichie dans les speckles nucléaires, ce qui est cohérent avec son rôle dans la régulation de la transcription et l'organisation de la chromatine.
• Elle est soumise à la phosphorylation et a été identifiée dans des études de protéomique, indiquant un contrôle post-traductionnel dynamique de son activité au sein du noyau.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 207-406, une région couvrant une partie du domaine C-terminal ; ainsi, l'anticorps peut reconnaître la forme complète de RING1A et potentiellement certaines variantes d'épissage, mais une validation sur des échantillons pertinents est recommandée.
• Pour le Western blot (WB), une bande d'environ 42 kDa est attendue ; envisagez d'utiliser des extraits nucléaires ou des lysats de cellules entières de lignées cellulaires humaines, murines ou de rat comme contrôles positifs, et optimisez la dilution de l'anticorps primaire.
• Pour l'immunohistochimie (IHC-P), validez l'anticorps sur des coupes de tissus paraffinés connus pour exprimer RING1A, en appliquant des méthodes de démasquage antigénique appropriées et en testant une gamme de dilutions pour obtenir une coloration nucléaire spécifique.
• En ELISA, la nature polyclonale permet une utilisation flexible comme réactif de capture ou de détection ; cependant, l'appariement avec un anticorps monoclonal peut améliorer la spécificité dans les formats sandwich—la variabilité entre lots doit être évaluée lors du développement du test.

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