RELA Lapin pAb - Q04207

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de RELA/p65

• RELA/p65 est une sous-unité du complexe du facteur de transcription NF-kappa-B, un régulateur pléiotrope présent dans presque tous les types cellulaires et jouant un rôle central dans l'inflammation, l'immunité, la différenciation, la croissance cellulaire, la tumorigenèse et l'apoptose.
• Les complexes NF-kappa-B sont des homo- ou hétérodimères formés par RELA, RELB, NFKB1/p105, NFKB1/p50, REL et NFKB2/p52 ; l'hétérodimère RELA-NFKB1 est la forme la plus abondante et agit comme un activateur transcriptionnel en se liant aux sites kappa-B dans les promoteurs des gènes cibles.
• RELA peut moduler l'accessibilité du promoteur aux facteurs de transcription et réguler indirectement l'expression des gènes, contribuant à son large potentiel régulateur. Références associées : PMID:29813070
• Dans les cellules non stimulées, les dimères NF-kappa-B sont séquestrés dans le cytoplasme par les protéines inhibitrices I-kappa-B ; lors de l'activation, I-kappa-B est phosphorylée et dégradée, libérant RELA pour sa translocation vers le noyau.
• RELA subit de multiples modifications post-traductionnelles, notamment l'acétylation et la phosphorylation, qui ajustent finement son activité transcriptionnelle, son affinité pour l'ADN et ses interactions avec des cofacteurs.
• Au niveau protéique, RELA est exprimé dans le myocarde, suggérant des rôles spécifiques aux tissus au-delà de ses fonctions de signalisation ubiquitaire.
• La localisation subcellulaire de RELA est régulée de manière dynamique, alternant entre le cytoplasme et le noyau en fonction de l'état d'activation de la voie NF-kappa-B.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 400–500 à l'extrémité C-terminale de RELA de souris, garantissant la reconnaissance de la protéine pleine longueur à travers les espèces présentant une forte homologie. Envisagez un alignement de séquences si vous étendez l'utilisation à d'autres organismes.
• Pour le Western blot, une bande d'environ 60 kDa est attendue ; incluez des contrôles positifs appropriés (par exemple, cellules HeLa ou RAW 264.7 stimulées) et vérifiez la spécificité en utilisant des lysats knockdown ou knockout si disponibles.
• En immunofluorescence/ICC, la localisation de RELA est typiquement cytoplasmique dans les cellules au repos et nucléaire lors de l'activation de NF-kappa-B ; optimisez les conditions de fixation et de perméabilisation pour préserver ce signal et utilisez des stimuli appropriés (par exemple, TNF-alpha) pour valider la translocation nucléaire.
• Pour les applications ELISA, l'appariement avec un anticorps de capture validé peut améliorer la sensibilité du test. Titrez l'anticorps pour déterminer les concentrations de travail optimales dans votre matrice d'échantillon spécifique.

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