Anticorps polyclonal de lapin anti-RBX1 pour WB et ELISA - P62877

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de RBX1

• RBX1 (également connue sous les noms ROC1 et RNF75) est un composant essentiel de plusieurs complexes de ligases E3 de l’ubiquitine culline-RING (CRL), qui ciblent les protéines pour leur ubiquitination et leur dégradation par le protéasome, régulant ainsi la progression du cycle cellulaire, la transduction des signaux et la transcription.
  Références associées : PMID:10230407, PMID:10579999, PMID:11961546
• Avec ARIH1, les complexes CRL assurent une ubiquitination séquentielle, dans laquelle ARIH1 ajoute la première ubiquitine aux substrats.
  Références associées : PMID:27565346
• En tant que composant du complexe CSA, RBX1 ubiquitine l’ARN polymérase II (POLR2A) au niveau de Lys-1268, une étape clé de la réparation par excision de nucléotides couplée à la transcription (TC-NER).
  Références associées : PMID:32355176, PMID:34526721
• RBX1 est un composant essentiel du complexe Cul7-RING(FBXW8), qui cible certaines protéines pour leur dégradation.
  Références associées : PMID:35982156
• Elle forme également un complexe de ligase Cul9-RING qui monoubiquitine p53/TP53.
  Références associées : PMID:38605244
• RBX1 recrute l’enzyme E2 CDC34 dans le complexe CRL et pourrait stimuler son autoubiquitination ; elle favorise également la neddylation des cullines via UBE2M.
• Elle intervient dans l’ubiquitination de KEAP1, ENC1 et KLHL41 et, en association avec ATF2 et CUL3, favorise la dégradation de KAT5, modulant ainsi l’activation d’ATM.
• La protéine se localise à la fois dans le cytoplasme et dans le noyau, est largement exprimée et contient un domaine à doigt de zinc essentiel à son activité de ligase E3 ; elle est sujette à l’acétylation et à la phosphorylation.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène est un peptide synthétique correspondant aux acides aminés 1-100 de RBX1 humain (NP_055063.1). Pour la WB, il est recommandé d’utiliser des lysats cellulaires totaux provenant de lignées cellulaires humaines, murines ou de rat ; le poids moléculaire prédit est d’environ 12 kDa. Utiliser des conditions appropriées de blocage et de détection.
• Pour l’ELISA, l’anticorps peut être utilisé pour détecter RBX1 dans le sérum ou dans des essais avec des protéines purifiées ; valider les résultats avec des témoins positifs et négatifs appropriés.
• Compte tenu du rôle central de RBX1 dans l’ubiquitination, envisager l’utilisation d’inhibiteurs du protéasome (par exemple, MG132) afin de stabiliser les substrats ubiquitinés dans votre dispositif expérimental.
• Optimiser la dilution de l’anticorps pour chaque application et type d’échantillon ; en cas de réactivité croisée avec la souris et le rat, vérifier l’homologie de séquence spécifique à l’espèce dans la région correspondant à l’immunogène.

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