Anticorps Monoclonal Rat anti-Souris CD45R/B220 conjugué pour Cytométrie en Flux - P06800 / P08575

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation du CD45R/B220

• La protéine tyrosine phosphatase de type récepteur C (PTPRC), communément appelée CD45, L-CA, Ly-5 ou T200, est une glycoprotéine transmembranaire. L'isoforme B220 est spécifiquement exprimée sur les cellules B et correspond à la variante de poids moléculaire élevé du CD45.
• Le CD45 est essentiel pour l'activation des cellules T via le récepteur des cellules T (TCR), agissant comme un régulateur positif de la coactivation des cellules T lors de sa liaison à DPP4. Le premier domaine phosphatase porte l'activité enzymatique, tandis que le second domaine influence la spécificité du substrat.
• Lors de l'activation des cellules T, le CD45 recrute et déphosphoryle SKAP1 et FYN, et déphosphoryle également LYN, modulant ainsi leurs activités kinase.
• Au niveau de la synapse immunologique, le CD45 interagit avec CLEC10A sur les cellules dendritiques immatures ; cette interaction reconnaît le CD45 porteur de l'antigène Tn sur les cellules T effectrices et contribue à la modulation des seuils d'activation des cellules T, aidant à prévenir l'auto-réactivité.
• Le CD45 se localise à la membrane cellulaire, aux radeaux membranaires et à la synapse immunologique, ce qui est cohérent avec son rôle dans la transduction du signal lors du contact cellule-cellule.
• L'épissage alternatif génère plusieurs isoformes de CD45 (par exemple, CD45R, CD45RO, B220), qui sont exprimées de manière différentielle parmi les sous-populations de leucocytes et influencent les résultats de la signalisation.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent une glycosylation et une phosphorylation étendues de type N et O, qui régulent l'activité phosphatase et l'expression de surface.
• Le CD45 de souris est codé par le gène Ptprc (Ly-5). L'anticorps décrit ici réagit de manière croisée avec le CD45R/B220 de souris.

Conseils Expérimentaux et Techniques

• L'anticorps est conjugué à l', un fluorophore excitable par laser violet. Vérifiez que votre cytomètre en flux est équipé d'un laser de 405 nm et de filtres d'émission appropriés (par exemple, filtre passe-bande 450/50) pour une détection optimale.
• Selon le fournisseur, l'anticorps présente une réactivité croisée avec le CD45R/B220 de souris. Si vous travaillez avec des échantillons humains ou d'autres espèces, effectuez les tests de réactivité croisée appropriés avant utilisation.
• Le CD45R/B220 est principalement exprimé sur les cellules B ; incluez des témoins de coloration positifs (par exemple, des splénocytes ou des lignées de cellules B) et négatifs (par exemple, des cellules T) bien caractérisés pour confirmer la spécificité dans les panneaux de cytométrie en flux.
• L'immunogène utilisé pour la génération comprend un peptide du CD45R/B220 souris/humain ; ainsi, l'anticorps pourrait théoriquement reconnaître le CD45R/B220 humain. Une validation dans l'espèce et le système d'échantillonnage concernés est recommandée.
• Les poids moléculaires de 130 à 144 kDa représentent différentes isoformes de CD45. Pour les applications au-delà de la cytométrie en flux (par exemple, le Western blot), assurez-vous d'utiliser des marqueurs de poids moléculaire appropriés et tenez compte du fait que ce produit est validé uniquement pour la FC.
• Stockez et manipulez l'anticorps selon les recommandations pour les conjugués fluorescents ; à réception, le produit est expédié dans des sacs de glace pour maintenir sa stabilité.

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