Anticorps monoclonal anti-CD3 de souris conjugué de rat pour la cytométrie en flux - P04235 / P22646

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du CD3 (chaînes delta et epsilon)

• Le CD3 delta (gène Cd3d) et epsilon (Cd3e) sont des composants essentiels du complexe récepteur des cellules T (TCR)-CD3 à la surface des lymphocytes T, jouant un rôle central dans l'immunité adaptative.
• Le complexe CD3 (chaînes delta, epsilon, gamma et CD247/zeta) transduit les signaux d'activation lors de l'engagement du TCR par les cellules présentatrices d'antigène, via la phosphorylation des motifs d'activation à base de tyrosine du récepteur immunitaire (ITAM) dans leurs domaines cytoplasmiques.
• CD3D est essentiel pour la différenciation des thymocytes et l'expression de surface correcte du complexe TCR-CD3 ; sa perturbation altère le développement des cellules T. Références associées : PMID:10935641
• Le CD3 delta interagit avec les corécepteurs CD4 et CD8, reliant fonctionnellement la reconnaissance du TCR à la signalisation du corécepteur, nécessaire à l'activation et à la sélection positive des cellules T CD4+ ou CD8+.
• Les chaînes CD3 delta et epsilon sont toutes deux des glycoprotéines transmembranaires de type I localisées à la membrane plasmique.
• Les modifications post-traductionnelles clés comprennent la formation de ponts disulfure, la glycosylation et la phosphorylation des ITAM par les kinases de la famille Src LCK et FYN.
• Ensemble, les chaînes CD3 delta et epsilon ont des poids moléculaires d'environ 19 kDa et 21 kDa, respectivement.

Guide expérimental et conseils techniques

• Le conjugué fluorescent permet une détection directe en cytométrie en flux (CF) sans nécessiter de réactifs de coloration secondaires.
• Pour réduire la liaison non spécifique, envisagez de pré-incuber les cellules avec un réactif de blocage approprié des récepteurs Fc et utilisez un contrôle d'isotype d'IgG de rat apparié.
• Optimisez la concentration de l'anticorps par titrage sur une plage (par exemple, 0,1–5 µg/mL) dans le système cellulaire pertinent pour obtenir le meilleur rapport signal/bruit.
• Préparez des suspensions de cellules uniques et évaluez la viabilité avant la coloration pour garantir des résultats robustes et reproductibles.
• L'anticorps est recommandé pour une utilisation avec des échantillons de souris ; validez les conditions de dosage pour votre configuration expérimentale spécifique.

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