Anticorps polyclonal de lapin anti-ZNF217 pour WB, IF/ICC, ELISA - O75362

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de ZNF217

• Identité de la protéine : La protéine à doigt de zinc 217 (ZNF217), également connue sous le nom de ZABC1, est un membre de la famille des protéines à doigt de zinc. Elle contient de multiples domaines à doigt de zinc de type C2H2 qui assurent la liaison à l'ADN et la régulation transcriptionnelle.
• Répresseur transcriptionnel : ZNF217 se lie aux promoteurs des gènes cibles et fonctionne comme un répresseur transcriptionnel, modulant l'expression génique pour favoriser la prolifération cellulaire et inhiber l'apoptose.
• Prolifération et survie cellulaire : La protéine joue un rôle dans la promotion de la prolifération cellulaire et l'antagonisme de la mort cellulaire. Elle améliore la phosphorylation d'AKT1 sur la Ser-473, activant la voie de signalisation PI3K/AKT.
• Localisation subcellulaire : ZNF217 est localisée dans le noyau, ce qui est cohérent avec son rôle de facteur de transcription.
• Modifications post-traductionnelles : Selon les mots-clés UniProt, ZNF217 est sujette à la phosphorylation et à la formation de liaisons isopeptidiques (ubiquitination), ce qui suggère une régulation par ces modifications.
• Caractéristiques structurelles : La protéine a un poids moléculaire prédit d'environ 115 kDa et appartient à la famille des protéines à doigt de zinc de type Krueppel C2H2. Elle contient de multiples répétitions de doigts de zinc qui stabilisent sa structure de liaison à l'ADN.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Conception de l'immunogène : L'anticorps a été produit contre une protéine recombinante couvrant les acides aminés 1-190 de la ZNF217 humaine (région N-terminale). Cette région peut contenir des épitopes exposés et conservés entre les espèces, ce qui explique la réactivité croisée observée avec la souris et le rat.
• Western Blot (WB) : Pour le WB, séparez les protéines sur un gel SDS-PAGE à un pourcentage approprié (par exemple, 8–10 %) pour résoudre la bande de ZNF217 d'environ 115 kDa. Validez empiriquement la dilution de l'anticorps primaire ; les plages typiques pour les anticorps polyclonaux sont de 1:500 à 1:2000.
• Immunofluorescence/Immunocytochimie (IF/ICC) : Comme ZNF217 est nucléaire, utilisez une étape de perméabilisation (par exemple, Triton X-100 à 0,1 %) lors de la fixation pour permettre l'accès de l'anticorps. Incluez une contre-coloration nucléaire (par exemple, DAPI) pour confirmer la localisation.
• ELISA : L'immunogène recombinant peut servir de contrôle positif en ELISA. Optimisez la concentration de revêtement et la dilution de l'anticorps en fonction de titrages préliminaires en échiquier.
• Réactivité croisée : Une réactivité croisée avec la ZNF217 de souris et de rat est rapportée. Vérifiez par alignement de séquence de la région N-terminale pour évaluer la conservation des épitopes. Validez dans des lignées cellulaires ou des tissus pertinents de ces espèces.

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