Lapin anticorps monoclonal anti-Rat IFN-gamma () pour cytométrie en flux - P01581

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'IFN-gamma

• L'IFN-gamma est un interféron de type II, une cytokine critique pour l'immunité innée et adaptative contre les infections virales, bactériennes et protozoaires.
• Il est produit principalement par les lymphocytes T activés et les cellules natural killer (NK).
• La signalisation par le récepteur de l'IFN-gamma (IFNGR1/IFNGR2) active la voie JAK-STAT, conduisant à la transcription des gènes stimulés par l'interféron.
• Joue un rôle clé dans la présentation des antigènes en induisant les sous-unités de l'immunoprotéasome et en augmentant l'expression des molécules de classe I et II du CMH à la surface cellulaire.
• Impliqué dans la régulation de la quiescence et de la différenciation des cellules souches hématopoïétiques dans des conditions homéostatiques.
• Les modifications post-traductionnelles incluent la glycosylation et la formation de pyroglutamate en N-terminal (acide pyrrolidone carboxylique).
• Protéine sécrétée, libérée principalement par les cellules immunitaires activées.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour la cytométrie en flux intracellulaire, les étapes de fixation et de perméabilisation doivent être optimisées pour votre type cellulaire spécifique. Les protocoles standard utilisant une fixation au paraformaldéhyde et une perméabilisation à la saponine peuvent convenir.
• Incluez des témoins de cellules T de rat non stimulées et stimulées pour confirmer la spécificité de l'anticorps. La stimulation par PMA/ionomycine de splénocytes de rat est un témoin positif courant.
• Le conjugué est excité par des lasers de 633-647 nm et émet dans le canal rouge lointain (par exemple, canal APC). Assurez-vous de paramètres de compensation appropriés.
• L'immunogène couvre les acides aminés 20-156, correspondant à la protéine IFN-gamma mature, ce qui suggère que l'anticorps reconnaît la forme sécrétée naturelle.
• Effectuez un titrage de la concentration de l'anticorps pour un marquage optimal et un fond minimal.

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