Anticorps monoclonal de lapin anti-CD4 de rat pour cytométrie en flux - P05540

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation du CD4

• Le CD4, également connu sous les noms d’antigène de surface des lymphocytes T T4/Leu-3 et d’antigène W3/25 chez le rat, est une glycoprotéine de surface cellulaire et un membre de la superfamille des immunoglobulines.
• Il agit comme corécepteur des molécules du CMH de classe II présentes sur les cellules présentatrices d’antigène, facilitant la signalisation du récepteur des lymphocytes T (TCR) en recrutant la tyrosine kinase LCK vers le complexe TCR-CD3.
• Il est essentiel au développement thymique des lymphocytes T auxiliaires et déclenche la différenciation des monocytes en macrophages matures.
• Dans les macrophages et les cellules tueuses naturelles (NK), le CD4 contribue à la différenciation, à l’activation, à l’expression des cytokines et à la migration cellulaire par l’intermédiaire de voies indépendantes du TCR/LCK.
• Il est codé par le gène Cd4 chez le rat (ID du gène : 24933 ; ID du gène orthologue humain : 920).
• Il est localisé dans la membrane cellulaire en tant que protéine membranaire de type I à un seul passage.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la formation de ponts disulfure, la N-glycosylation et la palmitoylation, qui régulent sa localisation membranaire et sa fonction.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• Cet anticorps est produit contre une protéine recombinante couvrant les acides aminés 1-394 du CD4 de rat, ce qui englobe la majeure partie du domaine extracellulaire et le rend adapté à la détection du CD4 de surface par cytométrie en flux.
• Pour les expériences de cytométrie en flux, effectuez une titration de l’anticorps afin de déterminer la concentration de marquage optimale pour votre type cellulaire, de réduire la liaison non spécifique et d’obtenir une séparation nette des populations.
• Utilisez des contrôles d’isotype appropriés ainsi que des contrôles fluorescence-moins-un (FMO) lors de la mise en place de panels multicolores afin d’assurer une stratégie de fenêtrage précise, en particulier avec le fluorochrome très lumineux.
• Une expression importante du CD4 est attendue dans les lymphocytes T auxiliaires, les monocytes, les macrophages et certaines sous-populations de cellules NK de rat ; validez les performances dans ces populations à l’aide de contrôles positifs et négatifs biologiquement pertinents.
• Comme il s’agit d’un anticorps monoclonal, la constance entre les lots est généralement élevée ; toutefois, chaque nouveau lot doit être validé dans votre système expérimental.

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