Anticorps monoclonal lapin anti-rat CD4 pour cytométrie en flux - P05540

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du CD4

• Le CD4, également connu sous le nom de T4/Leu-3 ou d'antigène W3/25, est une glycoprotéine de surface des cellules T codée par le gène Cd4 chez le rat.
• Il fonctionne comme un corécepteur membranaire intégral pour les molécules du CMH de classe II, interagissant avec le récepteur des cellules T (TCR) et les cellules présentatrices pour initier les réponses immunitaires.
• Lors de l'engagement du CMH, le CD4 recrute la kinase Src LCK, entraînant des cascades de phosphorylation qui favorisent l'activation des cellules T auxiliaires, la production de lymphokines et l'adhésion.
• Le CD4 est critique pour la différenciation des cellules T auxiliaires dans le thymus et peut également déclencher la maturation des monocytes en macrophages de manière indépendante du LCK.
• Au-delà des cellules T, l'expression du CD4 dans les macrophages et les cellules NK influence l'expression des cytokines et la migration cellulaire.
• La protéine est située sur la membrane cellulaire et possède quatre domaines de type immunoglobuline, avec un poids moléculaire prédit d'environ 51 kDa.
• Les modifications post-traductionnelles incluent la formation de ponts disulfures, la glycosylation et la palmitoylation, qui sont essentielles pour sa structure et sa fonction.
• Le CD4 est un marqueur clé pour l'identification des sous-ensembles de cellules immunitaires et un récepteur principal pour l'entrée du VIH chez l'homme (informations structurelles disponibles via le mot-clé 3D-structure).

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour la cytométrie en flux, titrez l'anticorps pour déterminer la concentration de travail optimale pour votre population cellulaire spécifique et votre montage expérimental.
• Utilisez des anticorps de contrôle isotype appropriés conjugués au même fluorophore () pour évaluer la liaison non spécifique.
• Incluez un colorant de viabilité pour exclure les cellules mortes, qui peuvent causer des faux positifs en raison d'une autofluorescence accrue.
• Lors du marquage, incubez dans l'obscurité à 4°C pour minimiser la modulation de l'antigène et le photoblanchiment du fluorophore.
• Puisque l'immunogène comprend les acides aminés 1-394, l'anticorps reconnaît probablement un épitope extracellulaire, adapté pour le marquage de surface sans perméabilisation. Vérifiez les performances si une perméabilisation est requise.
• Validez la spécificité de l'anticorps en utilisant des contrôles CD4-positifs (par exemple, splénocytes ou thymocytes de rat) et CD4-négatifs.

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