Anticorps monoclonal Lapin anti-souris VCAM-1/CD106 pour cytométrie en flux - P29533

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de VCAM-1

• La protéine d'adhésion cellulaire vasculaire 1 (VCAM-1), également appelée CD106, est une glycoprotéine d'adhésion cellulaire codée par le gène Vcam1 chez la souris. L'entrée UniProt P29533 indique un poids moléculaire d'environ 81 kDa, tandis que les spécifications du produit mentionnent des poids de 38 kDa et 81 kDa, correspondant probablement à des isoforms différents traités ou clivés ; l'épissage alternatif est documenté dans les mots-clés.
• VCAM-1 est majoritairement exprimée à la surface des cellules endothéliales et agit comme un régulateur majeur de l'adhésion des leucocytes à l'endothélium par des interactions avec les intégrines, jouant un rôle essentiel dans la surveillance immunitaire et les réponses inflammatoires.
• Pendant l'inflammation, VCAM-1 se lie à des ligands sur les cellules endothéliales activées pour déclencher l'activation des canaux calciques et de la petite GTPase RAC1, facilitant la migration transendothéliale des leucocytes.
• Dans la moelle osseuse, VCAM-1 agit comme point de contrôle de qualité pour l'entrée des cellules hématopoïétiques, fournissant un signal « ne me mangez pas » dans le contexte de la présentation par le CMH de classe I.
• La protéine est localisée sur la membrane cellulaire et peut également être sécrétée, ce qui supporte à la fois des fonctions de signalisation juxtacrine et paracrine.
• L'expression de VCAM-1 est tissu-spécifique, observée sur l'endothélium vasculaire inflammé, les cellules de type macrophage, les cellules dendritiques et dans la moelle osseuse.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent des ponts disulfure, la glycosylation et la conjugaison de type ubiquitine, qui peuvent moduler sa stabilité et ses propriétés d'adhésion. Elle appartient à la superfamille des immunoglobulines et contient plusieurs domaines de type Ig impliqués dans l'adhésion.

Conseils expérimentaux et techniques

• Cet anticorps monoclonal de lapin conjugué à l'est conçu pour l'analyse directe par cytométrie en flux (FC) de la VCAM-1 de souris. L'immunogène couvrant les acides aminés 25 à 310, qui correspond à une région du domaine extracellulaire, l'anticorps reconnaît probablement un épitope exposé à la surface cellulaire.
• Pour les expériences de cytométrie en flux, envisagez de titrer l'anticorps pour déterminer la concentration optimale adaptée à votre type d'échantillon et aux paramètres de votre instrument. Incluez des contrôles d'isotype appropriés et des contrôles sans fluorescence (FMO, Fluorescence-Minus-One) pour permettre un tri précis.
• Compte tenu de l'expression inductible de VCAM-1 sur les cellules endothéliales et de sa présence sur des sous-ensembles de leucocytes, validez le profil de coloration dans le contexte biologique pertinent, par exemple sur des cellules endothéliales de souris ou des populations de moelle osseuse stimulées par du LPS ou des cytokines, comparées à des échantillons non stimulés.
• Assurez-vous que le protocole de préparation de l'échantillon inclut un blocage suffisant des récepteurs Fc pour réduire la liaison non spécifique, en particulier lors de l'analyse des cellules de lignée myéloïde.

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