Lapin anti-Souris LAMP1/CD107a Anticorps Monoclonal pour IF/ICC, FC - P11438

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de LAMP1/CD107a

• La glycoprotéine 1 associée à la membrane lysosomale (LAMP1/CD107a) est une protéine transmembranaire fortement glycosylée, également connue sous le nom de LGP-120, P2B ou CD107a.
• Essentielle pour la biogenèse des lysosomes, la régulation du pH, l'autophagie et l'homéostasie du cholestérol, agissant comme un inhibiteur direct du canal à protons TMEM175 pour maintenir la lumière acide. Références connexes : PMID:15121881
• Dans les cellules natural killer (NK), LAMP1 participe au mouvement des granules cytotoxiques vers la surface cellulaire et au trafic de la perforine vers les granules lytiques, permettant la lyse des cellules cibles.
• Protège les cellules NK des dommages associés à la dégranulation en empêchant les blessures auto-infligées par le contenu de leurs propres granules cytotoxiques. Références connexes : PMID:23847195
• Présente des ligands glucidiques aux sélectines et a été impliquée dans la métastase des cellules tumorales. Références connexes : PMID:2676155
• Se localise principalement aux membranes des lysosomes et des endosomes tardifs, mais trafique également vers la membrane cellulaire et la membrane des granules cytolytiques lors de l'activation.
• Les modifications post-traductionnelles incluent une glycosylation N-liquée extensive et la formation de ponts disulfure, critiques pour sa stabilité structurelle et sa fonction dans l'environnement lysosomal.

Guidance Expérimentale et Conseils Techniques

• Pour l'immunofluorescence (IF/ICC), utilisez une fixation appropriée (ex : 4 % de PFA) et une perméabilisation (ex : 0,1 % de Triton X-100) pour permettre à l'anticorps d'accéder aux compartiments lysosomaux intracellulaires. Le fluorophore conjugué élimine le besoin d'un anticorps secondaire, simplifiant ainsi le protocole.
• En cytométrie en flux (FC), LAMP1 est principalement intracellulaire dans les conditions de repos, mais peut être détecté à la surface cellulaire après activation cellulaire (ex : dégranulation des cellules NK). Envisagez d'inclure une étape d'activation cellulaire et d'utiliser un colorant de viabilité pour exclure les cellules mortes.
• Validez l'anticorps dans une lignée cellulaire de souris pertinente ou un système de cellules primaires connu pour exprimer LAMP1 (ex : macrophages RAW 264.7 ou cellules NK primaires) et incluez des contrôles d'isotype appropriés pour la FC.
• L'immunogène couvre les acides aminés 208 à 363 du domaine luminal, ce qui peut être sensible à la dénaturation ; évitez une sur-fixation qui pourrait masquer l'épitope.

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