Anticorps monoclonal Lapin anti-souris Ki67 pour cytométrie en flux (intracellulaire) - E9PVX6

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de Ki67

• La protéine marqueur de prolifération Ki‑67 (homologue de l'antigène KI‑67), codée par le gène Mki67, s'associe à la surface des chromosomes mitotiques et joue un rôle essentiel dans la dispersion et le regroupement des chromosomes pendant la mitose.
• Elle est nécessaire pour maintenir les chromosomes mitotiques individuels dispersés dans le cytoplasme après la décomposition de l'enveloppe nucléaire : elle agit comme répulsif chromosomique au début de la mitose et comme attractif chromosomique en fin de mitose. Références associées : PMID:27362226
• Au début de la mitose, Ki‑67 forme des structures étendues en forme de brosse qui couvrent une grande partie de la surface chromosomique ; cette brosse crée une barrière stérique et de charge électrostatique, agissant comme un agent tensioactif pour empêcher les chromosomes de s'agréger en une masse de chromatine unique. Références associées : PMID:27362226
• En anaphase, la structure en brosse de Ki‑67 s'affaisse ; la déphosphorylation lors de la sortie de la mitose expose une région basique conservée qui induit une séparation de phase liquide-liquide dépendante de l'ARN, convertissant Ki‑67 en attractif chromosomique qui favorise le regroupement des chromosomes.
• Elle ne contribue pas à la structure interne des chromosomes mitotiques. Références associées : PMID:26949251
• Subcellulairement, elle se localise sur le chromosome, dans le noyau et le nucléole ; elle est principalement présente dans les cellules en prolifération. Elle contient des domaines de liaison à l'ADN (préférence pour l'ADN surenroulé riche en AT) et est sujette à l'acétylation, la phosphorylation et l'ubiquitination.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène couvre la région C-terminale (aa 1816‑2163) contenant les domaines répétés de Ki67 importants pour l'association chromosomique ; cette région est relativement conservée, ce qui peut permettre une réactivité croisée chez des espèces apparentées.
• Il a été optimisé pour la cytométrie en flux intracellulaire ; veillez à respecter des protocoles de fixation et perméabilisation adaptés pour permettre à l'anticorps d'accéder à Ki67 nucléaire. Incluez des contrôles d'isotype appropriés et validez l'essai sur une lignée cellulaire de souris en prolifération connue.
• La grande taille de la protéine (351 kDa) peut poser des problèmes pour d'autres techniques comme le Western blot ; si vous explorez d'autres applications, prévoyez des durées d'électrophorèse et de transfert prolongées et vérifiez systématiquement les performances de manière empirique.

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