Anticorps monoclonal de lapin anti-IgM de souris pour cytométrie en flux - P01872

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la région constante mu de la chaîne lourde d'immunoglobuline

• La région constante mu de la chaîne lourde d'immunoglobuline (région constante de la chaîne lourde IgM) est codée par le gène Ighm (Igh-6) et constitue la région constante des anticorps IgM.
• L'IgM lié à la membrane (mIgM) est un composant central du complexe du récepteur des lymphocytes B (BCR). Il fournit une signalisation tonique constitutive essentielle à la survie des lymphocytes B et médie la signalisation du pré-BCR qui régit la sélection des lymphocytes B et l'exclusion allélique.
• L'IgM sécrétée (sIgM) se multimérise principalement en pentamères (parfois en hexamères), ce qui confère une forte avidité pour la reconnaissance antigénique. Les sIgM naturelles sont polyréactives et reconnaissent les structures du soi et des pathogènes, tandis que les sIgM immunes sont antigéniques-spécifiques ; les deux sont nécessaires pour une réponse immunitaire humorale efficace. Références associées : PMID:10899913 PMID:28135254 PMID:34788614
• La sIgM exerce ses fonctions effectrices principalement via les récepteurs Fc (par exemple le FCMR sur les cellules lymphoïdes) et le système du complément. Elle recrute C1q pour initier la voie classique du complément et, avec C1q et la lectine liant le mannose, favorise la phagocytose des cellules apoptotiques par les macrophages, contribuant à l'élimination des épitopes auto-immunogènes. Références associées : PMID:10899913 PMID:11062505 PMID:28135254
• Dans l'immunité muqueuse, la sIgM est transportée à travers l'épithélium muqueux via le récepteur des immunoglobulines polymériques (PIGR) pour analyser la muqueuse. Les complexes IgM-antigène peuvent subir une rétrotranscytose médiée par FCMR à travers les cellules M vers les cellules présentatrices d'antigène dans les tissus lymphoïdes muqueux. Références associées : PMID:34788614
• Localisation subcellulaire : la forme sécrétée est libérée dans l'espace extracellulaire ; la forme liée à la membrane est située dans la membrane cellulaire avec un domaine transmembranaire à passage unique.
• Spécificité tissulaire : exprimé dans la moelle osseuse et dans les cellules B-1 et B-2 (au niveau protéique).
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la formation de ponts disulfure et la glycosylation, essentielles pour le repliement correct et la multimérisation.

Conseils expérimentaux et techniques

• L'immunogène comprend les acides aminés 105-454 de la région constante de l'IgM de souris ; par conséquent, l'anticorps est censé reconnaître le domaine constant de toutes les sous-classes d'IgM de souris indépendamment de la spécificité de la région variable.
• Pour la cytométrie en flux, titrez l'anticorps sur des splénocytes de souris ou des lignées de cellules B pour déterminer la concentration de coloration optimale. Envisagez une co-coloration avec un marqueur pan-lymphocyte B (par exemple, anti-CD19) pour confirmer la spécificité.
• Le fluorophore est un colorant rouge lointain (excitation ~650 nm, émission ~668 nm). Assurez-vous que votre cytomètre est équipé d'un laser rouge approprié (par exemple, 633 nm ou 640 nm).
• Si vous effectuez une coloration intracellulaire, optimisez les conditions de fixation et de perméabilisation, car l'épitope se trouve dans la région constante et peut être préservé après perméabilisation.
• Incluez un contrôle d'isotype (monoclonal de lapin conjugué au même fluorophore) pour tenir compte de la liaison non spécifique.

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