Anticorps monoclonal Lapin anti-IgE de souris pour cytométrie en flux (intracellulaire) - P06336

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la région constante de la chaîne lourde IgE de souris

• L'immunoglobuline epsilon constante lourde (chaîne lourde IgE) est la région constante des chaînes lourdes de l'immunoglobuline epsilon qui, associée aux chaînes légères, forme les anticorps IgE.
• Les anticorps IgE sont des glycoprotéines produites par les lymphocytes B ; ils peuvent exister sous forme de récepteurs de cellules B liés à la membrane ou d'anticorps sécrétés présents dans le sérum et les sécrétions muqueuses.
• Les domaines variables des chaînes lourdes et légères s'assemblent par recombinaison V(D)J et subissent une hypermutation somatique après exposition à l'antigène, permettant la maturation d'affinité pour des antigènes spécifiques.
• L'IgE lié à la membrane sur les lymphocytes B agit comme récepteur antigénique ; la liaison à l'antigène déclenche l'expansion clonale des cellules B et leur différenciation en plasmocytes sécrétant des anticorps.
• L'IgE sécrétée exerce ses fonctions effectrices en se liant aux récepteurs Fc epsilon de haute affinité sur les mastocytes et les basophiles, jouant un rôle central dans les réactions allergiques et la défense contre les parasites.
• La région constante de l'IgE contient plusieurs domaines immunoglobulines, et sa structure est stabilisée par des ponts disulfures et une glycosylation N-liée (mots-clés UniProt : Pont disulfure, Glycoprotéine, Domaine immunoglobuline).
• Au niveau sous-cellulaire, l'IgE est localisé à la fois sur la membrane cellulaire (en tant que récepteur de cellule B) et sécrété dans l'espace extracellulaire.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Cet anticorps est directement conjugué à l', un colorant fluorescent dans le rouge lointain compatible avec les cytomètres en flux standard ; il est recommandé pour le marquage intracellulaire (CF intra).
• L'immunogène couvre les acides aminés 83 à 421 de la région constante de l'IgE de souris, donc l'anticorps reconnaît probablement à la fois les formes d'IgE liées à la membrane et sécrétées après perméabilisation.
• Pour la cytométrie en flux intracellulaire, optimisez les conditions de fixation et de perméabilisation en utilisant des cellules contrôles positives et négatives appropriées (par exemple, cellules B de souris exprimant l'IgE vs lymphocytes négatifs pour l'IgE).
• Envisagez d'incorporer un contrôle d'isotype et un colorant de viabilité dans le panel pour distinguer le marquage spécifique.
• Lors de la conception de panels multicolores, notez que l'a un spectre d'émission similaire à l'APC et à l'Alexa Fluor® 647 ; évitez le co-marquage avec ces colorants sauf si une compensation correcte a été vérifiée.

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