Anticorps monoclonal de lapin anti-CD88/C5aR de souris pour cytométrie en flux - P30993

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de CD88/C5aR (C5AR1)

• Le récepteur chimiotactique 1 de l'anaphylatoxine C5a (C5AR1, également connu sous les noms CD88 ou C5aR) est un récepteur couplé aux protéines G pour le peptide inflammatoire C5a. Références associées : PMID:37852260
• Lors de la liaison à C5a, C5AR1 déclenche la chimiotaxie, la libération d'enzymes granulaires, la mobilisation du calcium intracellulaire et la production d'anions superoxyde, en se couplant aux protéines G(i)/G(o) pour inhiber l'adénylate cyclase. Références associées : PMID:37852260
• Le ligand interagit avec un site de haute affinité situé sur l'extrémité N-terminale extracellulaire (aa 1-37) et avec un second site dans la région transmembranaire qui active la signalisation en aval (par similarité).
• C5AR1 se localise sur la membrane cellulaire et dans les vésicules cytoplasmiques, ce qui est cohérent avec son rôle de récepteur transmembranaire.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la glycosylation, la phosphorylation et la sulfatation ; le récepteur contient des ponts disulfure et sept hélices transmembranaires typiques des RCPG.
• C5AR1 intervient dans l'immunité innée, la chimiotaxie et les réponses inflammatoires, et la protéine a été caractérisée sur le plan structural (structure 3D disponible).

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'anticorps monoclonal a été produit contre une protéine recombinante couvrant les acides aminés 1-37 de l'extrémité N-terminale extracellulaire de C5AR1 de souris, une région essentielle à la liaison de haute affinité de C5a, ce qui permet son utilisation en cytométrie en flux pour détecter l'expression à la surface cellulaire.
• Pour la cytométrie en flux, il est recommandé de titrer le conjugué afin de déterminer la concentration de coloration optimale et d'inclure des anticorps témoins d'isotype appropriés ainsi que des étapes de blocage des récepteurs Fc.
• Une validation sur des lignées cellulaires de souris ou des cellules immunitaires primaires (par exemple, des neutrophiles ou des macrophages) connues pour exprimer C5AR1 est recommandée afin de confirmer la spécificité.

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