Anticorps monoclonal de lapin anti-CD62L de souris pour cytométrie en flux - P18337

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de la L-sélectine

• La L-sélectine (CD62L, Ly-22) est une lectine dépendante du calcium (de type C) qui intervient dans l'adhésion cellulaire en se liant à des ligands glycoprotéiques présents sur les cellules voisines, jouant ainsi un rôle central dans le trafic des leucocytes. Références associées : PMID:1693096
• Il s'agit d'une glycoprotéine transmembranaire comprenant un domaine de lectine de type C en position N-terminale, un domaine de type EGF, deux domaines sushi (CCP/SCR), une région transmembranaire et une courte queue cytoplasmique (d'après les mots-clés UniProt et les annotations de domaines).
• La L-sélectine est principalement exprimée à la surface des leucocytes, notamment des lymphocytes, et elle est nécessaire à la domiciliation des lymphocytes en assurant leur adhésion aux veinules à endothélium haut (HEV) des ganglions lymphatiques périphériques.
• Lors de l'activation des leucocytes, la L-sélectine fait rapidement l'objet d'un clivage protéolytique à la surface cellulaire, ce qui régule le roulement et la transmigration des leucocytes.
• Elle participe également à l'arrimage initial et au roulement des leucocytes le long de l'endothélium activé au niveau des sites d'inflammation, une étape préalable à l'adhésion ferme et à l'extravasation.
• Au niveau subcellulaire, la L-sélectine est localisée dans la membrane cellulaire et regroupée à l'extrémité des microvillosités, ce qui facilite son interaction avec les ligands dans des conditions d'écoulement.
• Famille de gènes : SELL appartient à la famille des sélectines (SELL, SELE, SELP), qui sont des glycoprotéines transmembranaires de type I partageant une architecture de domaines similaire et assurant des interactions cellule-cellule dans le système vasculaire.
• Spécificité tissulaire : principalement exprimée dans les tissus lymphoïdes, ce qui est cohérent avec son rôle dans la recirculation des lymphocytes et la surveillance immunitaire.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène couvre la région extracellulaire (aa 39-332) du CD62L de souris, englobant les domaines de lectine et de type EGF qui sont probablement exposés à la surface cellulaire ; l'anticorps monoclonal obtenu est donc particulièrement adapté à la détection du CD62L natif sur des cellules vivantes par cytométrie en flux.
• En tant qu'anticorps monoclonal recombinant de lapin, il offre une grande constance entre les lots et une forte affinité, minimisant la variabilité dans les applications sensibles.
• Le conjugué fournit un marqueur fluorescent dans le rouge lointain, doté d'une forte luminosité et d'une grande photostabilité, idéal pour les panels de cytométrie en flux multicolores avec un chevauchement minimal dans le spectre visible.
• Le CD62L étant rapidement éliminé après la stimulation cellulaire, il convient d'optimiser les étapes de préparation des échantillons (par exemple, la température et la durée de stimulation) afin de préserver son expression de surface et de garantir une coloration reproductible.
• Bien que le poids moléculaire prédit soit de 42 kDa, la protéine mature glycosylée peut migrer avec un poids moléculaire apparent plus élevé en SDS-PAGE ; en cas d'adaptation pour un Western blot, valider dans des conditions réductrices appropriées.

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