Anticorps monoclonal lapin anti-souris CD5 pour cytométrie en flux - P13379

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du CD5

• CD5 est un récepteur spécifique des cellules lymphoïdes exprimé sur tous les lymphocytes T et le sous-ensemble B1a des lymphocytes B. Il joue un rôle dans la régulation de la signalisation TCR/BCR, la sélection des thymocytes et la tolérance immunitaire. Références associées : PMID:35720357
• Il interagit avec les ligands des lymphocytes B CD5L et CD72, médiant l'aide T dépendante du contact pour les cellules B et maintenant l'homéostasie des lymphocytes T/B régulateurs. Références associées : PMID:24950378, PMID:9064341, PMID:9723705
• CD5 agit comme un régulateur négatif de la signalisation TCR au cours du développement des thymocytes en recrutant des protéines de signalisation telles que LCK, CD3ζ, PI3K et CBL. Références associées : PMID:11157848
• La co-engagement de CD5 avec CD3 favorise la phosphorylation de CBL et la dégradation de VAV1, atténuant la signalisation en aval (par similarité).
• Dans les cellules B1a, CD5 module l'activation des lymphocytes B via l'influx de Ca²⁺ médié par TRPC1, conduisant à l'activation d'ERK1/2 et à la production d'IL-10 (par similarité).
• La protéine se localise sur la membrane cellulaire sous forme de glycoprotéine transmembranaire de type I à passage unique, avec des répétitions extracellulaires riches en cystéine de type récepteur scavenger, une hélice transmembranaire et une queue cytoplasmique contenant des sites de phosphorylation.
• CD5 est également connu sous le nom de Ly-1, Ly-A, Ly-12 ou Lyt-1 et constitue un marqueur pan-T et un marqueur des cellules B1a chez la souris.

Conseils expérimentaux et techniques

• L'immunogène comprend les acides aminés 25-371 du CD5 de souris, correspondant à l'ensemble du domaine extracellulaire, permettant la reconnaissance du CD5 natif de surface sur des cellules viables sans perméabilisation.
• Pour la cytométrie en flux, réalisez une série de dilutions (par exemple 1:25 – 1:200) pour déterminer la concentration de coloration optimale pour votre échantillon de cellules.
• Utilisez des anticorps de contrôle d'isotype appropriés et incluez des colorants de viabilité pour discriminer les cellules vivantes/mortes et minimiser le bruit de fond.
• Protégez l'anticorps de la lumière pendant la coloration et le stockage, car des expositions répétées peuvent réduire la fluorescence de l'.
• Les protocoles de coloration standard recommandent d'incuber 10⁶ cellules dans 100 µL de tampon de coloration pendant 20 à 30 minutes sur glace à l'obscurité, suivi d'un lavage.
• Cet anticorps est spécifique du CD5 de souris ; aucune réactivité croisée avec d'autres espèces n'a été rapportée ; une validation sur votre tissu cible est recommandée.

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