mAb Lapin anti-CD45.1 de souris - P06800

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du CD45.1

• Le CD45 (protéine phosphatase tyrosine de type récepteur C) est une phosphatase transmembranaire codée par le gène Ptprc chez la souris. L'épissage alternatif génère plusieurs isoformes, dont le CD45.1, qui diffèrent par la longueur de leur domaine extracellulaire et leur glycosylation.
• Le CD45 agit comme régulateur positif de l'activation des lymphocytes T en déphosphorylant les résidus tyrosine de régulation négative sur les kinases de la famille Src (par exemple LYN, FYN) et l'adaptateur SKAP1, facilitant ainsi la transduction du signal du TCR.
• La région intracellulaire contient deux domaines phosphatase en tandem ; le domaine D1 proche de la membrane assure l'activité catalytique, tandis que le domaine D2 module la spécificité vis-à-vis des substrats.
• Au-delà des composants du TCR, le CD45 interagit avec la DPP4 pour renforcer la co-stimulation et avec la CLEC10A sur les cellules dendritiques immatures pour limiter l'autoréactivité, ce qui met en évidence son rôle dans l'homéostasie immune.
• Il est ancré dans la membrane plasmique et se répartit dans les radeaux lipidiques ; lors de l'activation des lymphocytes T, le CD45 se redistribue vers la synapse immunologique pour former des microclusters de signalisation.
• Le CD45 subit une glycosylation N-liée extensive et une phosphorylation sur sérine/thréonine/tyrosine, qui régulent sa localisation, sa conformation et son activité enzymatique.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond à une séquence extracellulaire (aa 311–410) du CD45.1 de souris, ce qui indique que l'anticorps reconnaît probablement la forme native liée à la membrane, ce qui le rend parfaitement adapté pour le marquage de surface en cytométrie en flux.
• L'anticorps étant pré-conjugué à l', il peut être utilisé directement dans des panels multicolores sans marquage secondaire ; l'utilisation de contrôles de compensation appropriés est recommandée.
• Pour obtenir des résultats optimaux en cytométrie en flux, nous recommandons de titrer l'anticorps sur votre population cellulaire spécifique afin de déterminer la concentration de saturation et de minimiser le bruit de fond.
• Comme le CD45.1 est exprimé de manière ubiquitaire sur toutes les cellules de lignée hématopoïétique, incluez des contrôles d'isotype appropriés et un tri par FSC/SSC pour distinguer les sous-populations de leucocytes.
• Lors du marquage de tissus ou de cellules présentant une expression élevée de récepteurs Fc, une pré-incubation avec un blocage Fc est conseillée pour réduire la liaison non spécifique.

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