Lapin anti-Souris CD45 Anticorps Monoclonal pour IF/ICC, FC - P06800

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du CD45

• Le CD45, également connu sous le nom d'antigène commun des leucocytes (L-CA) et de Ly-5, est une phosphatase protéique tyrosine de type récepteur exprimée à la surface de toutes les cellules hématopoïétiques nucléées.
• Il joue un rôle critique dans l'activation des cellules T en déphosphorylant des molécules de signalisation clés telles que SKAP1, FYN et LYN, modulant ainsi les seuils de signalisation en aval.
• Par son interaction avec DPP4, le CD45 agit comme un régulateur positif de la coactivation des cellules T, améliorant la signalisation du récepteur des antigènes.
• Au niveau de la synapse immunologique, le CD45 interagit avec CLEC10A sur les cellules dendritiques, reconnaissant le CD45 modifié par l'antigène Tn sur les cellules T effectrices pour affiner l'activation et limiter l'auto-réactivité.
• La protéine contient deux domaines phosphatase intracellulaires en tandem ; le premier domaine possède une activité catalytique, tandis que le second influence la spécificité du substrat.
• L'épissage alternatif génère plusieurs isoformes, notamment B220 (CD45R), qui sont exprimées de manière différentielle parmi les sous-ensembles de leucocytes, permettant une régulation fonctionnelle diversifiée.
• Le CD45 se localise à la membrane cellulaire, aux radeaux membranaires et à la synapse immunologique, ce qui est cohérent avec son rôle dans l'initiation du signal et la modulation des co-récepteurs.
• D'importantes modifications post-traductionnelles, notamment la glycosylation N-liée et la phosphorylation, régulent sa stabilité, sa liaison aux ligands et son activité phosphatase.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Cet anticorps est dirigé contre une protéine recombinante couvrant les acides aminés 26 à 566 du CD45 de souris, englobant l'intégralité du domaine extracellulaire. Il est censé reconnaître un épitope extracellulaire, le rendant adapté pour le marquage de cellules vivantes en cytométrie en flux sans perméabilisation.
• Pour l'immunofluorescence, une fixation standard (par exemple, 4 % de PFA) et une perméabilisation facultative peuvent être utilisées. Un marquage membranaire doit être observé en raison de la topologie transmembranaire du CD45.
• En tant que conjugué direct , aucun anticorps secondaire n'est requis. Les titres optimaux doivent être déterminés empiriquement pour chaque système expérimental afin d'obtenir un marquage spécifique avec un fond minimal.
• Compte tenu de la forte expression du CD45 sur les leucocytes, cet anticorps est idéal pour identifier et trier les populations de cellules immunitaires en cytométrie en flux. Incluez des contrôles isotypiques appropriés et des contrôles fluorescence moins un (FMO).

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