Lapin anti-CD4 de souris mAb - P06332

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CD4

• CD4, également appelé L3T4 ou Ly-4, est une glycoprotéine de surface des lymphocytes T essentielle à l'immunité adaptative. Il agit comme co-récepteur pour les molécules du CMH de classe II sur les cellules présentatrices d'antigènes.
• Il interagit simultanément avec le récepteur des lymphocytes T (TCR) et le complexe peptide : CMH de classe II, facilitant l'activation des lymphocytes T. Lors de l'interaction, CD4 recrute la kinase Src LCK sur le complexe TCR-CD3, initiant des cascades de signalisation intracellulaires qui conduisent à la production de lymphokines, à l'adhésion et à l'activation des lymphocytes T auxiliaires.
• CD4 joue un rôle critique dans le développement des lymphocytes T auxiliaires dans le thymus et est également impliqué dans la différenciation des monocytes en macrophages fonctionnels.
• Au-delà des lymphocytes T, CD4 est exprimé sur d'autres cellules immunitaires telles que les macrophages, les cellules dendritiques et les cellules NK, où il contribue à la différenciation/l'activation, à l'expression de cytokines et à la migration cellulaire indépendamment de TCR/LCK.
• La protéine est une glycoprotéine membranaire de type I à passage unique, d'un poids moléculaire d'environ 51–55 kDa (UniProt : 51297 Da). Elle contient plusieurs domaines de type immunoglobuline et est sujette à des modifications post-traductionnelles incluant la N-glycosylation, la phosphorylation et la palmitoylation.
• CD4 est fortement exprimé sur les lymphocytes T auxiliaires, ce qui en fait un marqueur caractéristique de ce sous-ensemble de lymphocytes. Il est également présent sur les lymphocytes T régulateurs et un sous-ensemble de cellules lymphoïdes innées.
• Localisation subcellulaire : principalement sur la membrane cellulaire. Il cycle entre la membrane plasmique et les compartiments endosomaux ; la palmitoylation facilite sa localisation dans les radeaux lipidiques, ce qui est important pour la signalisation.

Conseils expérimentaux et techniques

• Cet anticorps a été obtenu contre une protéine recombinante correspondant aux acides aminés 27-394 du CD4 de souris, couvrant le domaine extracellulaire, et est validé pour la cytométrie en flux (FC). Lors de la conception de vos expériences, pensez à titrer l'anticorps pour optimiser la résolution du marquage, en particulier pour les populations cellulaires rares.
• CD4 étant exprimé sur les lymphocytes T auxiliaires et d'autres cellules immunitaires, vérifiez la spécificité dans le système d'échantillon murin approprié (par exemple, splénocytes, cellules de ganglion lymphatique ou thymocytes). Utilisez des contrôles d'isotype appropriés et des lignées cellulaires CD4+ et CD4- connues pour le tri.
• Pour les panneaux de cytométrie en flux multicolore, assurez-vous que le conjugué fluorochrome est compatible avec les autres marqueurs d'intérêt et que des contrôles de compensation sont inclus.
• Bien que ce produit soit validé pour la cytométrie en flux (FC), sa réactivité dans d'autres applications (par exemple, IHC, WB) n'a pas été testée ; si nécessaire, les utilisateurs doivent réaliser une validation interne.

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