Anticorps monoclonal de lapin anti-CD34 de souris pour cytométrie en flux - Q64314

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de l’antigène CD34 des cellules progénitrices hématopoïétiques

• CD34 est une glycoprotéine transmembranaire à passage unique qui appartient à la famille CD34 ; elle subit un épissage alternatif produisant plusieurs isoformes.
• On pense que cette protéine intervient dans l’adhésion des cellules souches à la matrice extracellulaire de la moelle osseuse ou directement aux cellules stromales, jouant ainsi un rôle essentiel dans les premières étapes de l’hématopoïèse.
• CD34 présente des ligands glucidiques aux sélectines, facilitant la liaison des cellules souches aux lectines exprimées par les cellules stromales ou par d’autres composants de la moelle (par similarité).
• Elle est principalement localisée au niveau de la membrane cellulaire.
• Chez la souris, l’ARNm de CD34 est fortement exprimé dans les lignées de cellules progénitrices hématopoïétiques, le cerveau et les testicules, et modérément dans le thymus, la rate et la moelle osseuse ; il est absent du foie adulte (PubMed:1709048). Au niveau protéique, CD34 est détecté dans le rein, plus précisément dans la branche fine de l’anse de Henle (PubMed:31605441). Références associées : PMID:1709048 PMID:31605441
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la glycosylation et la phosphorylation, comme l’indiquent les termes clés glycoprotéine et phosphoprotéine.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène couvre la région extracellulaire prédite (aa 35-287) du CD34 de souris, ce qui le rend adapté à la détection du CD34 exprimé à la surface cellulaire par cytométrie en flux sans perméabilisation.
• Pour la cytométrie en flux, effectuez une titration de l’anticorps afin de déterminer la concentration optimale pour votre type cellulaire spécifique et incluez des contrôles isotopiques appropriés ainsi que des colorants de viabilité.
• Compte tenu de l’expression attendue dans les cellules progénitrices hématopoïétiques, préparez soigneusement des suspensions monocellulaires à partir de moelle osseuse ou de rate et envisagez des stratégies de gating spécifiques des lignées.
• Validez le marquage dans le système d’échantillons pertinent, car les niveaux d’expression peuvent varier selon les tissus et les stades de développement.

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