Anticorps monoclonal lapin anti-souris CD28 pour cytométrie en flux - P31041

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CD28

• CD28 est une glycoprotéine de surface spécifique des lymphocytes T qui agit comme un récepteur co-stimulateur essentiel à l'activation, la prolifération et la survie des lymphocytes T, ainsi qu'au maintien de l'homéostasie immunitaire (PubMed:7688139). Références associées : PMID:7688139
• Il agit comme un amplificateur des signaux du récepteur des lymphocytes T (TCR) et délivre des signaux intracellulaires uniques qui modifient le programme d'expression génique des lymphocytes T.
• Après la liaison de ses ligands CD80 (B7-1) ou CD86 (B7-2), CD28 augmente la production de nombreuses cytokines, principalement l'IL-2, dans les sous-ensembles de lymphocytes T CD4+ et CD8+.
• La signalisation implique le recrutement de la protéine kinase C-thêta (PRKCQ) et de GRB2, conduisant à l'activation de NF-kappa-B par des voies dépendantes et indépendantes de PI3K/Akt.
• En association avec la liaison du TCR/CD3 et la co-stimulation par CD40L, CD28 favorise la production d'IL-4 et d'IL-10 dans les lymphocytes T.
• CD28 est localisé sur la membrane cellulaire et est une protéine transmembranaire de type I à passage unique contenant un domaine extracellulaire de type V de type immunoglobuline.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la glycosylation N-liée, la formation de ponts disulfure et la phosphorylation, qui régulent son expression de surface et ses fonctions de signalisation.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène (acides aminés 20 à 149) couvre le domaine extracellulaire, ce qui rend cet anticorps monoclonal adapté à la détection du CD28 natif sur la surface cellulaire par cytométrie en flux.
• Pour la CF, titrez l'anticorps conjugué à l'pour déterminer la concentration de coloration optimale et incluez un contrôle isotypique pour évaluer la liaison non spécifique.
• L'a des maxima d'excitation/émission d'environ 650/665 nm ; assurez une compensation correcte lorsque vous l'associez à d'autres fluorophores (par exemple PE, FITC) dans des panels multicolores.
• Validez la coloration sur des lignées de lymphocytes T de souris connues pour être positives pour CD28 ou des splénocytes primaires activés, et envisagez une fixation/perméabilisation si des cibles intracellulaires sont également analysées.

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