Anticorps monoclonal de lapin anti-souris CD226/DNAM-1 conjugué pour cytométrie en flux - Q8K4F0

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CD226/DNAM-1

• Le CD226 (DNAM-1/PTA1) est un récepteur transmembranaire de la superfamille des immunoglobulines, principalement exprimé sur les lymphocytes T cytotoxiques (CTL) et les cellules tueuses naturelles (NK).
• Il agit comme un récepteur de costimulation lors de la reconnaissance des cellules cibles ; la liaison à ses ligands PVR/CD155 ou NECTIN2/CD112 sur les cellules infectées ou tumorales favorise la cytotoxicité des cellules NK et des CTL.
  Références associées :
  PMID:30591568
• Le CD226 médie l'adhésion intercellulaire, la signalisation lymphocytaire et la sécrétion de lymphokines, contribuant à la surveillance immunitaire.
  Références associées :
  PMID:19029379, PMID:24658051, PMID:26552706
• Mécaniquement, l'engagement du ligand déclenche la phosphorylation du CD226 par les kinases de la famille Src (LYN/FYN), permettant la liaison de GRB2 et l'activation en aval des voies de signalisation de VAV1, PI3K, PLCG1, ERK, AKT et du calcium (Par similarité).
• Le CD226 est localisé à la membrane plasmique et contient deux domaines extracellulaires de type Ig, une seule hélice transmembranaire et une région intracellulaire sujette à une phosphorylation régulatrice.
• Des modifications post-traductionnelles, notamment la glycosylation et la formation de ponts disulfure, sont nécessaires pour une expression et une fonction correctes à la surface cellulaire.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'anticorps a été généré contre les acides aminés 19-254 du CD226 de souris, correspondant au domaine extracellulaire ; il est censé reconnaître le récepteur natif à la surface cellulaire, le rendant adapté aux applications de cytométrie en flux (FC) sur des cellules viables de souris.
• Pour une coloration optimale, titrer l'anticorps sur une plage de 0,1 à 10 µg/mL et inclure des contrôles isotypiques appropriés et des contrôles "fluorescence-moins-un" (FMO) pour définir les portes.
• Valider la coloration sur des lymphocytes de souris, tels que des splénocytes ou des cellules de ganglions lymphatiques, qui expriment le CD226 sur les cellules NK et les lymphocytes T activés.
• Étant donné que le CD226 est exprimé sur les lymphocytes cytotoxiques, une co-coloration avec des marqueurs de lignée (par exemple, CD3, NK1.1, CD8) peut aider à identifier des populations cellulaires spécifiques.

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