Anticorps monoclonal de lapin anti-souris CD14 conjugué à pour cytométrie en flux - P10810

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CD14

• CD14 est un antigène de différenciation des monocytes et une glycoprotéine riche en leucine spécifique des cellules myéloïdes, appartenant à la famille des répétitions riches en leucine (LRR) et ancrée à la membrane via une partie glycosylphosphatidylinositol (GPI).
• Agit comme un corécepteur pour le lipopolysaccharide bactérien (LPS), liant le LPS monomérique en concert avec la LBP et le livrant au complexe LY96/TLR4 pour initier les réponses immunitaires innées. Références associées : PMID:16148141
• La signalisation LPS-CD14 se produit via la voie MyD88/TIRAP/TRAF6, conduisant à l'activation de NF-kappa-B, la sécrétion de cytokines et les réponses inflammatoires. Références associées : PMID:15895089, PMID:8612135
• Fonctionne également comme un corécepteur pour les lipopeptides bactériens : agit en synergie avec TLR2:TLR6 pour les lipopeptides diacylés et avec TLR2:TLR1 pour les lipopeptides triacylés ; la signalisation se produit depuis la surface cellulaire, suivie d'un trafic dépendant des radeaux lipidiques vers l'appareil de Golgi.
• Sert de récepteur accessoire pour les lipoprotéines LprA, LprG et LpqH de M. tuberculosis, coopérant avec TLR2 et TLR1 pour moduler les fonctions des cellules présentatrices d'antigène. Références associées : PMID:19362712
• Se localise à la membrane cellulaire, aux radeaux membranaires et à l'appareil de Golgi ; une forme soluble sécrétée est également générée.
• Exprimé au niveau protéique sur les macrophages péritonéaux et les macrophages alvéolaires/dendritiques pulmonaires. Références associées : PMID:8612135, PMID:19362712
• Modifié post-traductionnellement : contient un site d'attachement d'ancre GPI, des ponts disulfure et une glycosylation liée à N, contribuant à sa stabilité structurelle et à sa fonction.

Guide expérimental et conseils techniques

• Pour la cytométrie en flux, titrer l'anticorps pour déterminer la concentration de travail optimale pour votre système cellulaire ; les dilutions de départ typiques vont de 1:50 à 1:200.
• Utiliser des contrôles isotypiques appropriés et envisager un blocage des récepteurs Fc pour réduire la liaison non spécifique, surtout lorsque vous travaillez avec des cellules myéloïdes.
• Si une coloration intracellulaire est nécessaire, fixer et perméabiliser les cellules après la coloration de surface ; noter que CD14 est principalement exprimé en surface mais peut s'internaliser après liaison du ligand.
• Valider la coloration sur des populations connues CD14-positives, comme les macrophages péritonéaux ou les macrophages alvéolaires pulmonaires, pour confirmer la spécificité et la sensibilité.

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