Anticorps monoclonal de lapin anti-souris CD126/chaîne IL-6Rα conjugué à pour FC - P22272

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la sous-unité alpha du récepteur de l'IL-6

• La sous-unité alpha du récepteur de l'interleukine-6 (IL-6Rα), également désignée CD126, IL-6R ou IL-6RA, est une protéine membranaire de type I à un seul passage appartenant à la superfamille des immunoglobulines. Elle fonctionne comme le composant de liaison au ligand du complexe récepteur de l'IL-6, essentiel pour la transduction du signal de l'IL-6.
• L'IL-6Rα liée à la membrane se lie à l'IL-6 avec une faible affinité et doit s'associer à la sous-unité transductrice de signal IL6ST/gp130 pour initier la signalisation intracellulaire. Cette signalisation classique est limitée aux cellules exprimant l'IL-6Rα, comme les hépatocytes et certaines cellules immunitaires, et est généralement associée à des résultats régénératifs et anti-inflammatoires. La signalisation en grappe se produit lorsque des complexes IL-6/IL-6Rα liés à la membrane sur une cellule activent l'IL6ST sur des cellules adjacentes.
• La signalisation par l'IL-6Rα oriente les lymphocytes T CD4+ naïfs vers la lignée Th17 via une signalisation en grappe médiée par les cellules dendritiques. Références associées : PMID:27893700
• L'IL-6Rα soluble (sIL-6R), générée par clivage protéolytique ou épissage alternatif, agit comme un agoniste de l'IL-6. Le complexe IL-6:sIL-6R peut stimuler les cellules qui n'expriment pas l'IL-6Rα liée à la membrane via une signalisation trans-, entraînant des processus pro-inflammatoires et contribuant aux maladies inflammatoires chroniques. Références associées : PMID:11113088
• La signalisation trans de l'IL-6 via le sIL-6R est nécessaire pour la régénération du tissu hépatique et sa protection lors d'une lésion. Références associées : PMID:11113088
• Dans le système nerveux central, la signalisation trans de l'IL-6 régule l'homéostasie énergétique et glucidique. Références associées : PMID:28402851
• L'IL-6Rα est localisée à la membrane cellulaire et est également sécrétée. Elle est exprimée par les cellules dendritiques et a été détectée dans le liquide céphalo-rachidien.
• La protéine est une glycoprotéine contenant des domaines de type immunoglobuline et des ponts disulfure, avec un poids moléculaire calculé d'environ 50 kDa.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène comprend les acides aminés 20–357 du domaine extracellulaire de l'IL-6Rα de souris, qui inclut la région de liaison au ligand. Cette conception favorise la génération d'anticorps reconnaissant le récepteur natif sur les cellules vivantes.
• Pour la cytométrie en flux utilisant le conjugué , déterminez la concentration de marquage optimale par titrage sur des cellules connues pour exprimer l'IL-6Rα (par exemple, lymphocytes T activés, cellules dendritiques ou lignées d'hépatocytes). Incluez des témoins isotype et fluorescence-moins-un appropriés.
• a des pics d'excitation/émission similaires à Alexa Fluor® 594 ; évitez le chevauchement spectral avec la PE, le Texas Red et d'autres fluorophores rouges. Assurez une compensation correcte à l'aide de témoins marqués individuellement.
• Évaluez la viabilité cellulaire avant le marquage, car les cellules mortes peuvent lier les anticorps de manière non spécifique. La fixation et la perméabilisation ne sont pas recommandées pour les antigènes de surface, sauf validation.
• Pour le blocage, utilisez 5 à 10 % de sérum normal de l'espèce hôte de l'anticorps secondaire en cas de marquage indirect, mais le conjugué direct peut nécessiter un blocage minimal. Validez dans votre système.

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