Lapin anti-Souris CD117/c-Kit Anticorps Monoclonal pour Cytométrie en Flux - P05532

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation du CD117/c-Kit

• Le CD117/c-Kit est un récepteur à activité tyrosine-kinase pour le facteur de cellules souches (SCF/KITLG), codé par le gène Kit. Plusieurs isoformes présentent des distributions tissulaires distinctes.
• Lors de la liaison du SCF, KIT active des cascades de signalisation en aval, notamment les voies PI3K/AKT, RAS/MAPK et JAK/STAT, qui régulent la survie cellulaire, la prolifération, l'hématopoïèse et la gamétogenèse.
• La structure du récepteur comprend cinq domaines immunoglobuline-like extracellulaires, une hélice transmembranaire unique et un domaine tyrosine-kinase intracellulaire.
• KIT est principalement un récepteur membranaire ; il subit une internalisation lors de l'activation et peut se localiser transitoirement dans le cytoplasme.
• L'autophosphorylation sur les résidus tyrosine déclenche la signalisation en aval, tandis que l'ubiquitination régule la dégradation du récepteur et l'atténuation du signal.
• Les isoformes 1 et 2 sont exprimées dans la moelle osseuse, les spermatogonies et les spermatocytes ; l'isoforme 3 est détectée dans les cellules germinales de stade ultérieur. L'isoforme 1 est largement exprimée dans les tissus hématopoïétiques.
• En tant que proto-oncogène, KIT est associé à des processus oncogéniques lorsqu'il est dysrégulé ; ses mutations ou sa surexpression sont liées à diverses malignités.

Guidance Expérimentale et Conseils Techniques

• Ce conjugué est validé pour la cytométrie en flux directe sur des échantillons de souris. Pour d'autres applications (ex : IHC, WB), l'optimisation et une validation indépendante sont recommandées.
• L'immunogène correspond au domaine extracellulaire (aa 25–523), ce qui rend l'anticorps adapté pour le marquage de surface des cellules vivantes sans perméabilisation.
• Excitation et détection : l'peut être excité par un laser rouge (633–640 nm) et détecté dans le canal APC. Assurez-vous d'une compensation appropriée dans les panneaux multicolores.
• Pour améliorer la discrimination vivant/mort, envisagez un co-marquage avec un colorant de viabilité, car le CD117 peut être libéré ou internalisé dans les cellules apoptotiques.
• Pour la cytométrie en flux quantitative, incluez un contrôle isotype approprié et effectuez une titration de l'anticorps pour déterminer les concentrations de marquage optimales.

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