Anticorps monoclonal de lapin anti-Mégaline/LRP2 pour IF-P et FC (intra) - P98164

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la Mégaline/LRP2

• La Mégaline (LRP2) est une glycoprotéine transmembranaire de type I d'environ 521 kDa, appartenant à la famille des récepteurs des lipoprotéines de basse densité, caractérisée par de multiples répétitions de liaison aux ligands, des domaines de type EGF et une courte queue cytoplasmique.
• Elle fonctionne comme un récepteur d'endocytose multiligand, médiant l'internalisation et la dégradation lysosomale de divers ligands, notamment des lipoprotéines, des complexes vitamine-porteur, des hormones, des enzymes et des médicaments, souvent en partenariat avec la cubiline (CUBN).
• Dans le rein, la mégaline est cruciale pour la réabsorption tubulaire des protéines filtrées ; elle médie la capture des métaux lourds liés à la métallothionéine (par exemple, cadmium, mercure), de la protéine anti-apoptotique survivine/BIRC5, des complexes vitamine D3/GC-DBP, de la myoglobine et des métalloprotéinases matricielles, préservant ainsi la fonction rénale. Références associées : PMID:15126248, PMID:23825075
• Dans le système nerveux central, la mégaline transporte la leptine à travers la barrière hémato-encéphalique, participe à la clairance et à la transcytose de Sonic hedgehog (SHH), et facilite la capture du folate essentielle à la fermeture du tube neural ; elle médie également la clairance de la bêta-amyloïde et soutient la neurogenèse en modulant la signalisation BMP.
• La mégaline est principalement localisée à la membrane plasmique apicale des épithéliums absorbants polarisés, comme les cellules du tube proximal rénal, et subit une endocytose médiée par la clathrine vers les endosomes.
• L'expression tissulaire est importante dans le placenta (cytotrophoblastes du premier et du troisième trimestre) et les tubes proximaux rénaux, comme confirmé par les analyses au niveau protéique. Références associées : PMID:27798286
• Les rôles physiologiques supplémentaires incluent la capture des androgènes/œstrogènes liés à la globuline de liaison aux hormones sexuelles (SHBG) dans les tissus reproducteurs, le maintien de la fonction auditive et le développement cardiaque embryonnaire.
• La protéine est sujette à la liaison du calcium, à la phosphorylation et à une glycosylation extensive, et les mutations de LRP2 sont associées au syndrome de Donnai-Barrow et à la surdité.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène couvre la région cytoplasmique C-terminale (aa 4446–4655), ce qui peut permettre la détection des formes complètes et certaines formes traitées de LRP2 dans des états dénaturés et natifs.
• Pour l'immunofluorescence sur tissus inclus en paraffine (IF-P), envisagez une étape de récupération antigénique induite par la chaleur avec un tampon citrate pH 6.0 pour une exposition optimale de l'épitope.
• Pour la cytométrie en flux intracellulaire (FC), la fixation et la perméabilisation sont obligatoires ; des titrages pilotes (par exemple, 0,5–5 µg/mL) dans le type cellulaire pertinent sont recommandés pour déterminer la concentration de coloration optimale.
• Bien que validé pour l'IF-P et la FC, cet anticorps monoclonal peut fonctionner dans d'autres applications ; une vérification indépendante est conseillée, compte tenu notamment de la grande taille et de la structure complexe de la mégaline.
• La réactivité croisée avec la mégaline de souris et de rat suggère des séquences d'épitopes conservées ; cependant, les utilisateurs doivent confirmer la réactivité dans leur système tissulaire ou cellulaire spécifique.

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