Anticorps monoclonal de lapin anti-Ki67 humain/singe pour cytométrie en flux (intracellulaire) - P46013

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de Ki67

• Protéine marqueur de prolifération Ki-67, codée par le gène MKI67, également connue sous le nom d'antigène KI-67, MIB-1, KIA et PPP1R105.
• Agit comme organisateur des chromosomes mitotiques : fonctionne comme répulsif chromosomique au début de la mitose pour maintenir la dispersion des chromosomes individuels, et comme attractif chromosomique à la fin de la mitose pour favoriser l'agrégation des chromosomes (PubMed:27362226, PubMed:32879492, PubMed:35513709). Références associées : PMID:27362226 PMID:32879492 PMID:35513709
• Forme une structure étendue en forme de brosse à la surface des chromosomes, fournissant une barrière stérique et électrostatique qui empêche l'effondrement chromosomique ; pendant l'anaphase, la déphosphorylation déclenche une séparation de phase liquide-liquide dépendante de l'ARN pour favoriser l'agrégation des chromosomes (PubMed:27362226, PubMed:32879492, PubMed:39153474). Références associées : PMID:27362226 PMID:32879492 PMID:39153474
• Se lie à l'ADN avec une préférence pour l'ADN surenroulé et riche en AT, et se lie également à l'ARN ribosomique prématuré pendant l'anaphase, facilitant la séparation de phase (PubMed:10878551, PubMed:28935370, PubMed:39153474). Références associées : PMID:10878551 PMID:28935370 PMID:39153474
• Localisation subcellulaire : réside dans le nucléole pendant l'interphase ; se relocalise à la surface des chromosomes mitotiques pendant la mitose.
• Soumise à des modifications post-traductionnelles comprenant la phosphorylation, l'acétylation et l'ubiquitination, qui régulent sa fonction et sa dynamique dépendante du cycle cellulaire.
• Désigné comme marqueur de prolifération en raison de son profil d'expression dépendant du cycle cellulaire.

Conseils expérimentaux et techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique correspondant à la région C-terminale (acides aminés 2271-2370) du Ki67 humain. Vérifiez que l'épitope est accessible dans votre protocole de coloration intracellulaire.
• Cet anticorps est directement conjugué à l'pour la cytométrie en flux intracellulaire en une étape. Optimisez les conditions de fixation et de perméabilisation pour votre type cellulaire afin de préserver l'épitope de Ki67 tout en assurant l'accès de l'anticorps au noyau.
• La réactivité croisée avec le singe cynomolgus (Macaca fascicularis) suggère une adéquation pour les études sur primates non humains ; validez la réactivité croisée dans votre système modèle spécifique.
• Ki67 est une grande protéine nucléaire (poids moléculaire prédit d'environ 359 kDa), assurez-vous donc une perméabilisation suffisante et envisagez l'utilisation d'une contre-coloration nucléaire pour le gate.
• Pour l'analyse quantitative de la prolifération, associez l'anticorps à un colorant de contenu ADN (par exemple iodure de propidium) dans un test de cytométrie en flux bivarié.

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