Lapin anti-Humain/Singe Ki67 mAb - P46013

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de Ki67

• La protéine marqueur de prolifération Ki-67 (antigène KI-67) est une protéine nucléaire codée par le gène MKI67 ; elle est largement utilisée comme marqueur de la prolifération cellulaire.
• Au début de la mitose, Ki-67 se relocalise des nucléoles vers la surface des chromosomes, où il forme des structures étendues en forme de brosse qui séparent physiquement les chromosomes, empêchant leur effondrement en une masse unique de chromatine par répulsion stérique et électrostatique. Références connexes : PMID:27362226
• À mesure que la mitose progresse vers l'anaphase, la déphosphorylation de Ki-67 déclenche un basculement fonctionnel : la brosse s'effondre et Ki-67 favorise le regroupement des chromosomes et l'exclusion des particules cytoplasmiques du noyau en formation. Références connexes : PMID:32879492, PMID:39153474
• Ki-67 peut subir une séparation de phase liquide-liquide à la surface des chromosomes, médiée par la liaison aux ARN ribosomiques prématurés, ce qui favorise la coalescence des chromosomes voisins lors de la mitose tardive. Références connexes : PMID:28935370, PMID:39153474
• La protéine présente une activité de liaison à l'ADN avec une préférence pour l'ADN superhélicoïdal et riche en AT. Références connexes : PMID:10878551
• La localisation subcellulaire est dynamique : principalement trouvée dans le nucléole pendant l'interphase, et associée aux chromosomes tout au long de la mitose.
• Ki-67 fait l'objet de multiples modifications post-traductionnelles, notamment la phosphorylation, l'acétylation et l'ubiquitination, qui régulent ses fonctions mitotiques.

Conseils expérimentaux et techniques

• L'anticorps a été développé contre un peptide synthétique de la région C-terminale (aa 2271–2370) ; confirmez que l'épitope est accessible dans votre système de détection, en particulier dans les conditions de fixation/perméabilisation utilisées pour la cytométrie en flux intracellulaire.
• Pour le marquage intracellulaire, optimisez les étapes de fixation et de perméabilisation selon les protocoles standard pour assurer une pénétration adéquate de l'anticorps et la détection de l'antigène.
• L'expression de Ki-67 dépend du cycle cellulaire ; incluez des témoins appropriés (par exemple, cellules privées de sérum ou non cycliques) pour valider la spécificité dans votre modèle expérimental.
• Le poids moléculaire prédit est d'environ 319–359 kDa ; confirmez la taille de la bande par électrophorèse sur gel dénaturant si elle est utilisée, et notez que des fragments protéolytiques peuvent également apparaître.

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