mAb Lapin anti-HLA-DR Humain/Singe pour FC - P01903

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de HLA-DRA

• HLA-DRA code pour la chaîne alpha de la molécule de classe II du MHC HLA-DR, qui s'associe à la chaîne beta (HLA-DRB) pour présenter les antigènes aux lymphocytes T CD4+, déclenchant des réponses immunitaires adaptatives incluant la production d'anticorps et l'activation des macrophages.
  Références associées :
  PMID:15265931 PMID:15322540 PMID:17334368
• Il présente les antigènes peptidiques extracellulaires de 10 à 30 acides aminés générés par la protéolyse lysosomiale des antigènes endocytés ; un grand résidu d'ancrage hydrophobe à la position 1 du peptide est essentiel pour une liaison stable au CMHII.
  Références associées :
  PMID:8145819
• Dans les tumeurs, HLA-DR présente des peptides antigéniques dérivés de cellules tumorales apoptotiques phagocytées ou de la macropinocytose de protéines tumorales sécrétées, modelant l'immunité anti-tumorale.
  Références associées :
  PMID:31495665
• La macroautophagie piège les protéines intracellulaires dans les autolysosomes ; leurs peptides sont ensuite présentés par HLA-DR, un processus important pour la sélection thymique des lymphocytes T et la tolérance centrale.
  Références associées :
  PMID:17182262 PMID:23783831
• Deux modes de sélection d'épitopes existent : « lier d'abord, couper/découper ensuite » pour les antigènes dérivés de pathogènes et « couper d'abord, lier ensuite » pour les peptides du soi, ce qui influence l'immundominance.
  Références associées :
  PMID:25413013
• La localisation subcellulaire s'étend à la membrane cellulaire, le réticulum endoplasmique, les endosomes précoces et tardifs, les lysosomes et les autolysosomes, reflétant son trafic dynamique au cours du traitement antigénique.
• L'expression tissulaire est restreinte aux cellules professionnelles présentatrices d'antigènes (macrophages, cellules dendritiques, lymphocytes B) et aux cellules épithéliales thymiques.
• Les modifications post-traductionnelles incluent la glycosylation N-liée, les ponts disulfures, les liaisons isopeptidiques et la conjugaison de type ubiquitine, qui modulent la stabilité du CMHII et le chargement peptidique.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'est un fluorophore brillant et photostable conjugué directement à l'anticorps ; aucun réactif de détection secondaire n'est nécessaire, ce qui minimise le bruit de fond non spécifique en cytométrie en flux.
• Cet anticorps monoclonal de lapin cible la chaîne HLA-DRA quasiment invariante, ce qui en fait un marqueur pan-HLA-DR pour les cellules immunitaires humaines et du singe cynomolgus.
• Pour un marquage optimal, titrez l'anticorps sur le type cellulaire concerné pour déterminer la concentration qui donne une séparation maximale entre les populations positives et négatives. Ajoutez des contrôles d'isotype appropriés et un blocage des Fc si nécessaire.
• Validez votre panel de marquage avec des contrôles monochromes et des contrôles « fluorescence moins un » (FMO) pour garantir une compensation et un gateage précis, en particulier pour les expériences multicolores.
• Envisagez de fixer les cellules après le marquage avec un fixatif compatible pour préserver la fluorescence et la stabilité de l'échantillon pour une analyse ultérieure.

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