Anticorps monoclonal de lapin anti-CD45 Humain/Singe conjugué pour la cytométrie en flux - P08575

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du CD45

• La tyrosine-protéine phosphatase C de type récepteur (CD45), codée par le gène PTPRC, est également connue sous le nom d'antigène commun des leucocytes (L-CA) et T200. De multiples isoformes existent en raison d'un épissage alternatif.
• Essentielle pour l'activation des lymphocytes T via le récepteur antigénique ; le premier domaine PTPase a une activité enzymatique, tandis que le second module la spécificité du substrat. Lors de l'activation des lymphocytes T, le CD45 recrute et déphosphoryle SKAP1 et FYN, et module l'activité de LYN. Références associées : PMID:35767951
• Agit comme un récepteur pour la protéine UL11 du cytomégalovirus humain, médiant la liaison virale aux lymphocytes T et altérant la prolifération et la signalisation des lymphocytes T.
• Se localise à la membrane cellulaire, aux radeaux membranaires et à la synapse immunologique, se positionnant ainsi aux sites de reconnaissance antigénique et de transduction du signal.
• Les isoformes 1–3, 5 et 7 sont détectées dans les thymocytes, tandis que les isoformes 4, 6 et 8 ne le sont pas, indiquant des profils d'expression spécifiques aux tissus.
• Modifiée post-traductionnellement par glycosylation et phosphorylation ; classée sous les mots-clés hydrolase, protéine phosphatase, glycoprotéine et interaction hôte-virus.
• Appartient à la famille des protéine-tyrosine phosphatases, sous-classe des récepteurs 1/6, agissant comme un centre de signalisation clé dans les cellules immunitaires.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène comprend les acides aminés 26–577 du CD45 humain, englobant la région extracellulaire ; ainsi, l'anticorps est censé reconnaître des épitopes extracellulaires natifs.
• Pour la cytométrie en flux, titrer l'anticorps pour déterminer la concentration optimale pour votre type cellulaire spécifique et les réglages de l'instrument ; utiliser un contrôle isotype approprié.
• Valider la coloration sur des cellules connues positives pour le CD45 (par ex. PBMC humaines, Jurkat) et sur des cellules négatives (par ex. érythrocytes).
• Étant donné que le CD45 est fortement exprimé sur les leucocytes, envisager un blocage des récepteurs Fc pour minimiser la liaison non spécifique.
• Le conjugué est compatible avec les filtres d'émission courants (par ex. 614/20 nm) ; assurer une compensation appropriée dans les panels multicolores.
• La fixation et la perméabilisation peuvent altérer la reconnaissance des épitopes du CD45 ; tester si la coloration de surface est suffisante pour votre protocole.
• Conserver l'anticorps non dilué à 2–8°C, à l'abri de la lumière, et éviter les cycles répétés de congélation-décongélation pour préserver l'intégrité du conjugué.

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