Lapin anti-Humain/Singe CD4 Anticorps Monoclonal pour Cytométrie en Flux - P01730

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation du CD4

• Le CD4 est une glycoprotéine transmembranaire de type I de 51 kDa appartenant à la superfamille des immunoglobulines, exprimée à la surface des cellules T auxiliaires, des macrophages, des cellules dendritiques et des cellules NK comme une marque distinctive des lymphocytes T auxiliaires.
• En tant que corécepteur, le CD4 se lie aux molécules de classe II du CMH sur les cellules présentatrices d'antigène, interagissant simultanément avec le récepteur des cellules T (TCR) pour recruter la kinase Src LCK, ce qui initie des cascades de signalisation conduisant à l'activation des cellules T, à la production de cytokines et à la différenciation.
• Dans le thymus, le CD4 participe à la sélection positive et à l'engagement de lignée des cellules T auxiliaires CD4+, essentiels pour l'immunité adaptative.
• Le CD4 sert de récepteur principal pour le VIH-1, médiant l'entrée virale dans les cellules hôtes ; il est par la suite régulé à la baisse par la protéine d'accessoire Vpu du VIH-1 pour aider à l'évasion immunitaire. Références connexes : PMID:12089508, PMID:16331979, PMID:2214026, PMID:17346169
• Le CD4 agit également comme récepteur cellulaire pour l'entrée du virus de l'herpès humain 7 (HHV-7). Références connexes : PMID:7909607
• Les modifications post-traductionnelles incluent la glycosylation N-liée, la formation de ponts disulfure dans ses domaines Ig-like extracellulaires, et la palmitoylation sur un résidu cystéine cytoplasmique, ce qui module la localisation membranaire et la signalisation.
• La protéine se localise principalement à la membrane plasmique via une hélice transmembranaire à passage unique, sa région extracellulaire étant organisée en quatre domaines de type immunoglobuline (D1–D4) critiques pour les interactions avec les ligands.

Guidance Expérimentale et Conseils Techniques

• L'immunogène utilisé pour générer cet anticorps est une protéine CD4 humaine recombinante ; par conséquent, l'anticorps reconnaît des épitopes conformationnels dépendants de la structure native et convient au marquage de surface en cytométrie en flux.
• Pour les applications FC, titrez l'anticorps en utilisant des cellules mononucléaires du sang périphérique (PBMC) humaines ou de cynomolgus pour déterminer la concentration optimale. Incluez des contrôles isotypiques appropriés et effectuez un blocage des récepteurs Fc si nécessaire.
• Le marquage de sang total ou de suspensions cellulaires uniques de tissus lymphoïdes peut être envisagé, en suivant des protocoles standard avec des anticoagulants et des colorants de viabilité appropriés.
• Les étapes de fixation et de perméabilisation doivent être validées car elles peuvent altérer l'accessibilité des épitopes ; pour le marquage intracellulaire, utilisez des protocoles optimisés pour les antigènes membranaires.
• Assurez-vous que les paramètres de compensation de l'instrument sont correctement calibrés pour le fluorophore afin d'éviter le chevauchement spectral, particulièrement dans les panneaux multicolores.

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