mAb Lapin anti-CD20 humain/singe pour cytométrie en flux - P11836

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du CD20

• Le CD20 (MS4A1) est une protéine membranaire spécifique des lymphocytes B qui régule l'influx calcique nécessaire au développement, à la différenciation et à l'activation des lymphocytes B, et agit comme composant du canal calcique opéré par réserve après stimulation du récepteur des lymphocytes B. Références associées : PMID:12920111, PMID:3925015, PMID:7684739, PMID:18474602
• Le CD20 appartient à la famille des protéines transmembranaires 4A (MS4A) et est exprimé à la surface des lymphocytes B depuis le stade pré-B jusqu'au stade mature, mais pas sur les plasmocytes.
• La protéine subit un épissage alternatif, produisant des isoformes d'environ 33 kDa (forme canonique complète) et 14 kDa, ce qui correspond aux poids moléculaires indiqués dans les spécifications fournies.
• Le CD20 est sujet à des modifications post-traductionnelles telles que la phosphorylation et la palmitoylation, qui peuvent influencer sa localisation membranaire et sa fonction.
• Au niveau subcellulaire, le CD20 est un composant intégral de la membrane cellulaire, c'est une protéine transmembranaire multi-passante.
• En tant que cible pharmaceutique, le CD20 est l'antigène cible des anticorps monoclonaux utilisés pour traiter les hémopathies malignes B et les maladies auto-immunes.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène était dirigé contre un peptide intracellulaire (acides aminés 100–200 du CD20 humain), ce qui suggère que l'anticorps peut reconnaître un épitope accessible dans les cellules perméabilisées ; pour le marquage de surface, validez les performances sur des échantillons non perméabilisés vs perméabilisés.
• Pour la cytométrie en flux, réalisez des expériences de titration pour déterminer la concentration de travail optimale pour votre type cellulaire spécifique, et incluez des contrôles d'isotype appropriés.
• Utilisez des lignées de lymphocytes B (par exemple Raji, Daudi) ou des cellules mononucléées du sang périphérique (PBMC) comme contrôles positifs, et des plasmocytes ou des lignées de lymphocytes T comme contrôles négatifs.
• La réactivité croisée avec le CD20 du macaque cynomolgus a été confirmée ; la réactivité croisée avec d'autres espèces doit être validée indépendamment si nécessaire.

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