Ac monoclonal de lapin anti-CD16 humain/singe pour cytométrie en flux - P08637/O75015

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de CD16

• CD16A (FCGR3A) est un récepteur de faible affinité pour le fragment Fc des IgG, activé de manière optimale par des complexes antigène-IgG regroupés afin de déclencher la cytotoxicité cellulaire dépendante des anticorps (ADCC).
  Références associées : PMID:11711607, PMID:21768335, PMID:22023369
• Le récepteur ne se lie pas aux IgG monomériques libres, empêchant ainsi une activation immunitaire inappropriée en l’absence de stimulation antigénique.
  Références associées : PMID:11711607, PMID:21768335, PMID:22023369
• Sur les cellules tueuses naturelles (NK), CD16A assure les fonctions effectrices des IgG, déclenchant la production de cytokines (par ex. IFNG) et la dégranulation pour combattre les infections virales.
  Références associées : PMID:24412922, PMID:25786175
• CD16A contribue à la génération de cellules NK adaptatives de type mémoire, capables d’éliminer efficacement les cellules infectées par des virus grâce à l’ADCC.
  Références associées : PMID:24412922, PMID:25786175
• Le récepteur régule la survie et la prolifération des cellules NK en empêchant l’apoptose des progéniteurs des cellules NK.
  Références associées : PMID:29967280, PMID:9916693
• La signalisation via des adaptateurs contenant des ITAM active la PI3K et augmente le calcium intracellulaire, entraînant l’activation des cellules NK, la dégranulation ou la production de cytokines pro-inflammatoires selon le statut de phosphorylation du récepteur.
  Références associées : PMID:1825220, PMID:23024279, PMID:2532305
• CD16A stimule la costimulation des cellules NK et peut déclencher la lyse des cellules cibles indépendamment de la liaison aux IgG.
  Références associées : PMID:10318937, PMID:23006327
• Le récepteur intervient dans les activités antitumorales des anticorps thérapeutiques, en particulier ceux dont les domaines Fc sont afucosylés, en renforçant l’ADCC et l’opsonisation.
  Références associées : PMID:27670158, PMID:34485821, PMID:28566370
• CD16A est une glycoprotéine transmembranaire située sur la membrane cellulaire et pouvant être sécrétée ; elle est exprimée sur les cellules NK et sur un sous-ensemble de monocytes circulants.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène couvre le domaine extracellulaire (aa 20-208) de FCGR3A et FCGR3B, ce qui suggère que l’anticorps peut reconnaître un épitope conservé partagé par ces deux isoformes de CD16. Envisagez de vérifier la spécificité envers chaque isoforme dans votre population cellulaire cible.
• Pour la cytométrie en flux, effectuez une titration du conjugué afin de déterminer la concentration de marquage optimale à l’aide de lignées cellulaires pertinentes ou de cellules primaires connues pour exprimer CD16, telles que les cellules NK ou les monocytes.
• Comme CD16A est libéré de la surface cellulaire, incluez des contrôles appropriés (par ex. contrôle isotopique, échantillons non stimulés par rapport aux échantillons stimulés) et envisagez d’évaluer à la fois le marquage de surface et le marquage intracellulaire si une sécrétion est à craindre.
• Une réactivité croisée avec le singe cynomolgus a été rapportée, mais validez la réactivité dans le type cellulaire ou le tissu de cynomolgus spécifique qui vous intéresse avant utilisation.

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