Anticorps monoclonal de lapin anti-CD14 Humain/Singe conjugué pour la cytométrie en flux - P08571

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du CD14

• Le CD14, également désigné antigène My23, est une glycoprotéine ancrée par un glycosylphosphatidylinositol (GPI) et membre de la famille des répétitions riches en leucine (LRR).
• Fonctionne comme un corécepteur pour le lipopolysaccharide bactérien (LPS). En concert avec la LBP, le CD14 capture le LPS monomérique et le transfère au complexe LY96/TLR4, déclenchant la signalisation immunitaire innée. Références associées : PMID:1698311 PMID:23264655
• La signalisation en aval nécessite les adaptateurs MyD88, TIRAP et TRAF6, conduisant finalement à l'activation de NF-kappa-B et à la sécrétion de cytokines pro-inflammatoires. Références associées : PMID:8612135
• Le CD14 fonctionne également comme un corécepteur pour les hétérodimères TLR2:TLR6 et TLR2:TLR1, reconnaissant respectivement les lipopeptides diacylés et triacylés. Ces agrégats de récepteurs signalent depuis la surface cellulaire avant d'être internalisés vers l'appareil de Golgi via une voie dépendante des radeaux lipidiques. Références associées : PMID:16880211
• De plus, le CD14 se lie au LDL électronégatif (LDL(-)) et médie la libération de cytokines induite par cette lipoprotéine modifiée. Références associées : PMID:23880187
• La protéine est principalement localisée sur la membrane plasmique, enrichie dans les radeaux membranaires, et est transportée vers l'appareil de Golgi ; une forme soluble est également libérée dans le milieu extracellulaire.
• Le CD14 est fortement exprimé à la surface des monocytes et de la plupart des macrophages tissulaires, avec des niveaux plus faibles détectables sur les granulocytes. Références associées : PMID:1698311

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène couvre le domaine extracellulaire (aa 20-352), ciblant une région critique pour la liaison du ligand ; vérifier la réactivité avec le CD14 membranaire et soluble dans le système d'échantillon pertinent.
• En tant que conjugué , utiliser les réglages appropriés du laser et des filtres pour la cytométrie en flux (ex. excitation 488 nm, émission 500–550 nm). Titrer l'anticorps pour optimiser le rapport signal/bruit sur les populations de monocytes/macrophages.
• Confirmer l'expression dans des contrôles positifs tels que les PBMC humaines ou les monocytes isolés ; la réactivité croisée avec le cynomolgue permet des études translationnelles sur les primates non humains.
• Pour la coloration intracellulaire ou la détection du pool localisé dans l'appareil de Golgi, envisager des étapes de perméabilisation après le marquage de surface.

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