mAb lapin anti-CD14 humain/singe pour FC - P08571

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du CD14

• Le CD14 (antigène de différenciation monocytaire CD14, My23) est une glycoprotéine ancrée par glycosylphosphatidylinositol (GPI) appartenant à la superfamille des répétitions riches en leucine (LRR).
• Il agit comme corécepteur pour le lipopolysaccharide (LPS) bactérien : il lie le LPS monomérique en collaboration avec la LBP et le transmet au complexe TLR4/MD-2 pour déclencher l'activation de l'immunité innée. Références associées : PMID:1698311, PMID:20133493, PMID:22265692, PMID:23264655
• La signalisation en aval est médiée par MyD88, TIRAP et TRAF6, ce qui conduit à l'activation de NF-κB et à la sécrétion de cytokines proinflammatoires. Références associées : PMID:8612135
• Le CD14 sert également de corécepteur pour les hétérodimères TLR2/TLR1 et TLR2/TLR6, reconnaissant respectivement les lipopeptides triacylés et diacylés ; il assure la signalisation depuis la surface cellulaire, puis est ciblé vers l'appareil de Golgi par une voie dépendante des radeaux lipidiques. Références associées : PMID:16880211
• Il se lie au LDL électronégatif (LDL(-)) et médie la libération de cytokines induite par le LDL modifié, reliant le métabolisme lipidique aux réponses inflammatoires. Références associées : PMID:23880187
• Le CD14 est majoritairement localisé sur la membrane cellulaire, enrichi dans les radeaux membranaires, il est également détecté dans l'appareil de Golgi ; une forme soluble est sécrétée.
• Il est fortement exprimé sur les monocytes et les macrophages tissulaires, et faiblement sur les granulocytes : c'est un marqueur de surface clé pour l'identification des monocytes/macrophages.
• La protéine contient des ponts disulfures intrachaînes et est modifiée post-traductionnellement par N-glycosylation, ce qui contribue à sa stabilité structurelle et à ses interactions avec les ligands.

Conseils expérimentaux et techniques

• Pour la cytométrie en flux, titrez l'anticorps pour déterminer la concentration optimale adaptée à votre type de cellule et vos conditions de coloration spécifiques.
• Incluez des contrôles d'isotype appropriés et, si possible, des contrôles sans fluorescence (FMO) pour évaluer la coloration de fond.
• Cet anticorps détecte le CD14 sur les cellules mononucléées du sang périphérique humain et cynomolgue ; confirmez sa réactivité sur votre échantillon cible.
• L'immunogène (aa 20-352) couvre le domaine extracellulaire du CD14, ce qui suggère une reconnaissance potentielle à la fois de la forme membranaire ancrée au GPI et de la forme soluble.
• Si une coloration intracellulaire est nécessaire, assurez-vous que les protocoles de fixation/perméabilisation sont compatibles avec le fluorophore .

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