Lapin anti-Humain β2 Microglobuline mAb pour Cytométrie en flux - P61769

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la β2 microglobuline

• La bêta-2-microglobuline (B2M) est une protéine non glycosylée de 13 kDa qui sert de chaîne légère invariante des molécules du CMH de classe I, essentielle pour la présentation des antigènes aux lymphocytes T cytotoxiques.
• En tant que membre de la superfamille des immunoglobulines, la B2M contient un domaine de type immunoglobulinique et est associée de manière non covalente à la chaîne alpha du CMH I à la surface cellulaire.
• La B2M est synthétisée sous forme de pré-protéine, transformée en forme mature après clivage du peptide signal, et est exprimée de manière constitutive dans divers tissus, reflétant son rôle fondamental dans la surveillance immunitaire.
• Au niveau subcellulaire, la B2M est principalement située à la surface cellulaire en tant que partie du complexe CMH I et se trouve également sous forme sécrétée dans les fluides corporels.
• La protéine subit des modifications post-traductionnelles, notamment la glycation, la formation de ponts disulfures et la formation d'acide pyrrolidone carboxylique à l'extrémité N-terminale, qui sont importantes pour sa stabilité et sa fonction.
• Le EsxA ou EsxA-EsxB exogène de M. tuberculosis se lie à la B2M et entrave son exportation vers la surface cellulaire, compromettant potentiellement la présentation des antigènes de classe I, ce qui pourrait représenter un mécanisme d'évasion immunitaire. Références connexes : PMID:25356553
• Des mutations dans le gène B2M ont été liées à l'amylose et d'autres maladies, soulignant son importance clinique dans les troubles de l'agrégation des protéines.

Conseils expérimentaux et techniques

• L'anticorps est généré contre un immunogène recombinant couvrant les acides aminés 21-119 de la B2M humaine, englobant le domaine extracellulaire mature ; il reconnaît donc probablement la conformation native sur les cellules vivantes, ce qui le rend adapté à la cytométrie en flux.
• Pour l'analyse par cytométrie en flux de la β2-microglobuline de surface cellulaire, envisagez d'utiliser ce conjugué directement dilué dans un tampon approprié ; un protocole standard de coloration pour les cellules mononucléaires du sang périphérique humain ou les lignées cellulaires lymphocytaires peut être utilisé.
• Validez la concentration optimale de l'anticorps par titration dans le système expérimental pertinent et incluez des contrôles isotypiques appropriés pour assurer la spécificité.
• Comme la B2M est un facteur soluble, les surnageants ou le plasma peuvent être analysés à l'aide de tests de cytométrie sur billes ; cependant, les performances de cet anticorps dans de tels tests n'ont pas été spécifiquement testées.

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