Anticorps monoclonal de lapin anti-ULBP2 humain pour FC - Q9BZM5

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de l’ULBP2

• L’ULBP2 (UL16-binding protein 2), également connue sous les noms ALCAN-alpha, N2DL2, NKG2DL2 ou RAET1H, est une protéine membranaire ancrée par GPI et un membre de la famille RAET1 des ligands de NKG2D.
• Elle sert de ligand au récepteur KLRK1/NKG2D, un récepteur activateur exprimé sur les cellules tueuses naturelles (NK) et certains sous-ensembles de lymphocytes T, déclenchant des réponses immunitaires cytotoxiques.
• Lorsqu’elle se lie à NKG2D, l’ULBP2 induit la cytotoxicité médiée par les cellules NK contre les cellules cibles, jouant ainsi un rôle essentiel dans l’immunosurveillance tumorale.
• L’ULBP2 est localisée sur la membrane cellulaire par l’intermédiaire d’une ancre GPI, mais une forme sécrétée existe également ; elle est en outre détectée dans le réticulum endoplasmique.
• Son expression est fortement restreinte au niveau tissulaire : elle est présente dans diverses lignées cellulaires cancéreuses et dans les tissus fœtaux, mais absente des tissus adultes normaux, ce qui souligne son potentiel en tant qu’antigène associé aux tumeurs.
• La protéine comporte un peptide signal, des sites de N-glycosylation et des ponts disulfure, qui sont importants pour son repliement et sa fonction corrects.
• Il est connu que l’ULBP2 interagit avec des protéines virales d’évasion immunitaire (par exemple, UL16 du cytomégalovirus humain), d’où son identification initiale en tant que protéine se liant à UL16.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène correspond au domaine extracellulaire (aa 26–217) de l’ULBP2 humaine, englobant la région de liaison à NKG2D ; cette conception permet de détecter l’ULBP2 exposée à la surface lors de la cytométrie en flux sur cellules vivantes.
• Pour l’analyse par cytométrie en flux, colorez les cellules viables sans perméabilisation afin d’évaluer l’ULBP2 localisée sur la membrane, car la perméabilisation peut entraîner une coloration intracellulaire de la fraction associée au réticulum endoplasmique.
• Incluez des contrôles positifs appropriés (par exemple, des lignées cellulaires cancéreuses exprimant l’ULBP2) et des contrôles négatifs (cellules de tissus normaux) afin de valider la spécificité, conformément au profil d’expression restreint de la protéine.
• Titrez l’anticorps afin de déterminer la concentration optimale pour votre système expérimental et assurez une compensation adéquate lors du multiplexage avec d’autres fluorophores.
• En raison de la possibilité de clivage ou de sécrétion de l’ULBP2, choisissez soigneusement les conditions de coloration (durée, température) afin de minimiser la perte de l’antigène de surface.

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