Anticorps monoclonal Lapin anti-Humain TIGIT pour cytométrie en flux - Q495A1

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du TIGIT

• TIGIT (récepteur immunologique des cellules T avec domaines Ig et ITIM), également connu sous le nom de VSIG9, VSTM3 ou WUCAM, est un récepteur inhibiteur de la superfamille des immunoglobulines.
• Il supprime l'activation des cellules T en favorisant la génération de cellules dendritiques immunorégulatrices matures. Références associées : PMID:19011627
• Lors de sa liaison à PVR/CD155 ou NECTIN2/CD112 sur les cellules présentatrices d'antigène, TIGIT transmet des signaux inhibiteurs en recrutant les kinases Src, GRB2 et SHIP1 pour inhiber les voies PI3K/MAPK, et s'associe à la bêta-arrestine-2 pour supprimer la signalisation NF-kappa-B via TRAF6. Références associées : PMID:23154388 PMID:24817116
• TIGIT fonctionne également comme un récepteur pour NECTIN4, inhibant la cytotoxicité des cellules NK. Références associées : PMID:32503945
• Il est localisé à la membrane cellulaire, ce qui est cohérent avec son rôle dans la modulation de la synapse immunitaire.
• TIGIT est exprimé à de faibles niveaux sur les cellules T CD4+ mémoires périphériques et régulatrices ainsi que sur les cellules NK, et est régulé à la hausse suite à l'activation.
• Les modifications post-traductionnelles incluent la glycosylation et la phosphorylation ; la protéine contient un pont disulfure et un domaine ITIM.

Conseils expérimentaux et techniques

• Cet anticorps conjugué à l'est conçu pour la cytométrie en flux directe ; utilisez des contrôles isotypiques appropriés et optimisez le titrage pour votre type cellulaire spécifique et votre état d'activation.
• L'immunogène correspond à la région extracellulaire (aa 22-141), garantissant la reconnaissance du TIGIT exprimé en surface sur les cellules vivantes.
• Puisque TIGIT est régulé à la hausse lors de l'activation des cellules T et NK, envisagez de stimuler les cellules (par exemple, avec anti-CD3/CD28) avant le marquage pour améliorer la détection.
• Pour les panneaux de cytométrie en flux multicolores, vérifiez les paramètres de compensation avec des contrôles marqués individuellement et incluez des colorants de viabilité pour exclure les cellules mortes.
• Confirmez le profil de bandes du poids moléculaire (~18 kDa pour la protéine principale, ~26 kDa glycosylée) si vous effectuez une validation par Western blot complémentaire.

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