Anticorps monoclonal de lapin anti-T-bet/Tbx21 humain pour la cytométrie en flux - Q9UL17

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de T-bet/Tbx21

• T-bet (TBX21) est un facteur de transcription T-box, également appelé facteur de transcription T-box spécifique des cellules T T-bet, T-PET, TBET ou TBLYM, et constitue le régulateur principal de l'engagement de la lignée Th1.
• Il induit la différenciation Th1 en activant les programmes génétiques Th1 (par ex. IFNG, CXCR3) et en réprimant les programmes Th2/Th17 ; il supprime les cytokines Th2 (IL-4, IL-5, IL-13) par la répression de GATA3 et NFATC2, et inhibe les cellules Th17 en bloquant la transactivation de RORC médiée par RUNX1. Références associées : PMID:10761931
• Il remodèle de manière épigénétique le locus IFNG en induisant une accessibilité permissive de la chromatine et une méthylation des CpG, en recrutant des complexes de remodelage de la chromatine, notamment KDM6B, SWI/SNF et un complexe méthyltransférase de H3K4me2. Références associées : PMID:33296702
• Il active également la transcription des gènes Th1 en recrutant le complexe Mediator et P-TEFb (complexe de super-élongation) au niveau des super-enhancers des cellules Th1 activées. Références associées : PMID:27292648
• Il protège les cellules Th1 contre les réponses aberrantes aux IFN de type I dans un microenvironnement riche en IFN-γ en agissant comme répresseur des facteurs de transcription des IFN de type I et des gènes stimulés par les IFN.
• Il est nécessaire au développement correct des cellules tueuses naturelles (NK) et des cellules T invariantes associées aux muqueuses (MAIT). Références associées : PMID:33296702
• Il se localise exclusivement dans le noyau, ce qui concorde avec son rôle de facteur de transcription.
• Son expression est spécifique des cellules T ; il constitue un déterminant clé de l'immunité adaptative et joue un rôle dans l'asthme (variant pathologique) ainsi que dans la commutation de classe vers les IgG2a antivirales.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène couvre la région C-terminale (aa 322-535) de T-bet humain ; tenez compte de la conservation des séquences entre les espèces si une réactivité croisée au-delà de l'espèce humaine est souhaitée, et validez le produit dans le système d'échantillons concerné.
• Cet anticorps est validé pour la cytométrie en flux intracellulaire (FC intra). Pour une détection optimale de T-bet nucléaire, utilisez des tampons de fixation et de perméabilisation optimisés pour les antigènes nucléaires, et effectuez un titrage de l'anticorps afin de minimiser le bruit de fond.
• Incluez les contrôles isotypiques appropriés et comparez les populations de cellules T au repos et activées afin de confirmer la spécificité, car l'expression de T-bet dépend de l'activation.
• Pour les panels multiplex, notez qu'peut être combiné à d'autres fluorophores ; assurez-vous que les contrôles de compensation sont correctement configurés.

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