mAb Lapin anti-Syk humain pour CF (intra) - P43405

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de Syk

• Syk (Spleen tyrosine kinase, p72-Syk) est une tyrosine kinase non réceptrice qui médie la transduction de signal en aval de divers récepteurs transmembranaires, notamment le récepteur des cellules B (BCR), et régule l'immunité innée et adaptative, l'adhésion cellulaire et l'activation des plaquettes. Références associées : PMID:12387735, PMID:33782605

• Essentielle au développement des cellules B, Syk est requise pour la maturation des cellules B lors de la transition pro-B vers pré-B. Après activation du BCR, elle phosphoryle des adaptateurs clés comme BLNK et BTK, initiant de multiples cascades de signalisation en aval. Références associées : PMID:12456653

• Dans l'immunité innée, Syk est activée par des récepteurs tels que CLEC7A en réponse à des pathogènes fongiques, conduisant à la production de ROS, à l'activation de l'inflammasome et à la transcription de cytokines médiée par NF-kB.

• Syk exerce également des fonctions dans des contextes non immunitaires, notamment l'adhésion cellulaire médiée par les intégrines, la maturation des ostéoclastes, l'activation des plaquettes par le collagène et le développement vasculaire. Références associées : PMID:12387735

• Au niveau sous-cellulaire, Syk est localisée dans le cytoplasme et à la membrane cellulaire, où elle s'assemble en complexes de signalisation avec des récepteurs ou des adaptateurs contenant des motifs ITAM phosphorylés.

• Syk est largement exprimée dans les tissus hématopoïétiques, notamment dans les lignées de cellules B du stade pro-B jusqu'aux plasmocytes, ainsi que dans les neutrophiles, ce qui confirme son rôle dans les réponses immunitaires à la fois adaptatives et innées. Références associées : PMID:8163536, PMID:15123770

• En tant que kinase possédant deux domaines SH2, Syk catalyse la phosphorylation des tyrosines et est régulée par phosphorylation et ubiquitination ; des mutations sont associées à des troubles immunitaires et à des cancers.

Conseils expérimentaux et techniques

• Pour la cytométrie en flux intracellulaire, assurez une fixation et une perméabilisation appropriées pour permettre à l'anticorps d'accéder à la Syk cytoplasmique et associée à la membrane. Validez le protocole en utilisant une lignée cellulaire connue pour exprimer Syk (par exemple, des lignées de lymphocytes B) et un contrôle négatif adapté.
• L'immunogène correspondant à une séquence de la région centrale de la Syk humaine (acides aminés 251-350), cet anticorps peut reconnaître les deux isoformes (p72-Syk et p70-Syk) si l'épitope est conservé. Confirmez la spécificité sur votre échantillon par Western blot ou spectrométrie de masse si la discrimination des isoformes est requise.
• Réalisez un titrage de l'anticorps pour obtenir un indice de coloration optimal dans votre système expérimental. Envisagez l'utilisation d'un colorant de viabilité pour exclure les cellules mortes, qui peuvent augmenter le bruit de fond dans les tests intracellulaires.
• Incluez toujours un contrôle isotype conjugué au même fluorophore pour évaluer la liaison non spécifique.

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