Anticorps monoclonal lapin anti-SIGLEC9 humain pour cytométrie en flux - Q9Y336

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de SIGLEC9

• La lectine 9 de type Ig de liaison à l'acide sialique (SIGLEC9, aussi appelée CD329 ou FOAP-9) est une molécule d'adhésion putative qui médie la liaison dépendante de l'acide sialique aux cellules, reconnaissant préférentiellement l'acide sialique lié en α-2,3 ou α-2,6.
• Le site de liaison aux ligands peut être masqué in cis par des interactions avec les acides sialiques sur la surface de la même cellule, modulant potentiellement l'adhésion cellulaire et la signalisation.
• SIGLEC9 est un membre de la superfamille des immunoglobulines et contient un domaine de type V de type Ig et deux domaines de type C2 de type Ig, caractéristiques de la famille des lectines de liaison à l'acide sialique.
• Il est exprimé sur les leucocytes du sang périphérique, notamment les neutrophiles et les monocytes, mais pas les éosinophiles ; on le trouve également dans le foie, le foie fœtal, la moelle osseuse, le placenta, la rate, et à des niveaux plus faibles dans de nombreux autres tissus.
• La protéine est une protéine membranaire de type I à passage unique, avec une région extracellulaire contenant le site de reconnaissance de l'acide sialique et une queue cytoplasmique qui peut participer à la signalisation inhibitrice.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la glycosylation N-liée et la formation de ponts disulfures, qui sont essentielles pour la stabilité structurelle et la fonction.
• L'épissage alternatif génère plusieurs isoformes, et la protéine est soumise à un clivage protéolytique qui peut réguler son expression de surface et générer du SIGLEC9 soluble.
• En tant que lectine, SIGLEC9 est impliqué dans les interactions cellule-cellule et la modulation immunitaire, et sa dérégulation a été associée à des pathologies inflammatoires et auto-immunes.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• Cet anticorps a été obtenu contre une protéine recombinante correspondant au domaine extracellulaire (acides aminés 18-348) de SIGLEC9 humain ; il est attendu qu'il reconnaisse la forme native exprimée à la surface de la protéine.
• Pour la cytométrie en flux, envisagez de titrer l'anticorps pour déterminer la concentration de coloration optimale pour votre type de cellule et vos conditions d'essai, car un excès d'anticorps peut augmenter le bruit de fond ou affecter le rapport signal/bruit.
• En raison du masquage cis potentiel des épitopes de SIGLEC9 par les acides sialiques à la surface cellulaire, la désialylation enzymatique (par exemple, traitement par la neuraminidase) peut être testée pour améliorer la liaison de l'anticorps dans certains dispositifs expérimentaux ; cependant, validez d'abord dans le système d'échantillon concerné.
• Étant donné que SIGLEC9 est exprimé majoritairement sur les neutrophiles et les monocytes, incluez des stratégies de tri appropriées et des marqueurs de lignée pour confirmer la spécificité dans les populations leucocytaires mixtes.
• La compensation de fluorescence est requise lors de l'utilisation d'en combinaison avec d'autres fluorophores ; utilisez des contrôles à coloration unique pour définir précisément les matrices de compensation.

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