Anticorps monoclonal Lapin anti-Humain Siglec-8 conjugué pour cytométrie en flux - Q9NYZ4

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du Siglec-8

• Le Siglec-8 (Sialic acid-binding Ig-like lectin 8), également connu sous le nom de SAF-2 (sialoadhesin family member 2), est un récepteur transmembranaire appartenant à la famille des Siglec de lectines liant l'acide sialique, codé par le gène SIGLEC8 (GeneID : 27181).
• Fonctionne comme une molécule d'adhésion putative médiant la liaison dépendante de l'acide sialique aux cellules sanguines. Se lie préférentiellement à l'acide sialique lié en α-2,3 et, dans une moindre mesure, à l'acide sialique lié en α-2,6. Le site de liaison peut être masqué par des interactions en cis avec des acides sialiques sur la même surface cellulaire. Références connexes : PMID:10625619 PMID:10856141
• Reconnaît les épitopes glycaniques contenant un acide N-acétylneuraminique terminal (acide sialique) et un galactose sous-jacent sulfaté en 6-O, avec une forte préférence pour les structures sialyl-Lewis X sulfatées en 6-O. Références connexes : PMID:27357658
• La protéine présente plusieurs domaines de type immunoglobuline, une hélice transmembranaire et une queue cytoplasmique. L'épissage alternatif génère des isoformes avec des poids moléculaires prédits de 44, 46 et 54 kDa, cohérents avec sa forme glycosylée mature.
• Localisé à la membrane plasmique, le Siglec-8 est spécifiquement exprimé sur les cellules sanguines, en particulier les basophiles, les mastocytes et les éosinophiles, ce qui en fait un marqueur clé pour ces lignées.
• Les modifications post-traductionnelles incluent la N-glycosylation et la formation de ponts disulfures, essentielles pour la stabilité structurelle et la reconnaissance des ligands. La structure tridimensionnelle a été déterminée expérimentalement (PDB disponible), mettant en évidence l'architecture de son domaine lectine.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène couvre le domaine extracellulaire de liaison à l'acide sialique (aa 17–363), donc cet anticorps est susceptible de reconnaître les conformations natives – envisagez de l'utiliser principalement pour le marquage de surface en cytométrie en flux.
• Validé pour la cytométrie en flux (FC) avec des échantillons humains ; pour d'autres applications (par exemple, Western blot, IHC), une optimisation interne, y compris les conditions de récupération de l'antigène et de blocage, est conseillée.
• En raison de l'expression restreinte sur les éosinophiles, les mastocytes et les basophiles, incluez des témoins positifs appropriés (par exemple, éosinophiles purifiés ou lignées cellulaires) et des témoins d'isotype pour confirmer la spécificité.
• Effectuez un titrage de l'anticorps pour un rapport signal/bruit optimal, car les niveaux d'expression de Siglec-8 peuvent varier selon les types cellulaires.

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