Anticorps monoclonal de lapin anti-RANKL/CD254 humain - O14788

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de RANKL/CD254

• Le membre 11 de la superfamille des ligands du facteur de nécrose tumorale (TNFSF11), également connu sous le nom de RANKL, OPGL, ODF, TRANCE et CD254, est une protéine transmembranaire de type II appartenant à la famille des ligands du TNF.
• En tant que régulateur clé du métabolisme osseux, RANKL se lie à TNFRSF11A/RANK pour promouvoir la différenciation et l'activation des ostéoclastes, tandis que l'interaction avec le récepteur leurre TNFRSF11B/OPG inhibe ce processus. Il induit l'ostéoclastogenèse via des oscillations du Ca²⁺ et la transcription de gènes médiée par NFATC1.
• RANKL pourrait jouer un rôle dans l'augmentation de la résorption osseuse dans l'hypercalcémie humorale des tumeurs malignes, soulignant son implication dans la perte osseuse pathologique. Références associées : PMID:22664871
• Au-delà de l'os, RANKL fonctionne dans le système immunitaire en augmentant la prolifération des lymphocytes T naïfs induite par les cellules dendritiques, suggérant un rôle dans les interactions cellules T/cellules dendritiques et les réponses immunitaires dépendantes des cellules T.
• Au niveau subcellulaire, RANKL se trouve au niveau de la membrane plasmique avec une topologie transmembranaire, dans le cytoplasme, et est également sécrété sous une forme soluble (sRANKL) générée par épissage alternatif ou clivage protéolytique.
• Son expression est la plus élevée dans les ganglions lymphatiques périphériques, avec des niveaux plus faibles dans la rate, les leucocytes du sang périphérique, la moelle osseuse, le cœur, le placenta, le muscle squelettique, l'estomac et la thyroïde.
• Les modifications post-traductionnelles incluent la glycosylation, et la protéine est associée aux processus de développement, à la différenciation cellulaire et à des variants pathologiques liés à l'ostéopétrose.

Guide expérimental et conseils techniques

• Pour la cytométrie en flux intracellulaire (FC intra), optimisez les protocoles de perméabilisation et de fixation pour assurer l'accès de l'anticorps au RANKL cytoplasmique tout en préservant l'intégrité de l'épitope.
• Incluez des contrôles négatifs appropriés, tels qu'un anticorps d'isotype correspondant ou des cellules avec une expression de TNFSF11 réduite, pour confirmer la spécificité du marquage.
• Comme RANKL peut être lié à la membrane ou sécrété, évaluez son expression dans des lignées cellulaires ou des cellules primaires connues pour exprimer RANKL, comme les lymphocytes T activés ou les ostéoblastes.
• Validez les performances de l'anticorps dans votre système d'échantillon spécifique, car l'accessibilité de l'épitope peut varier selon les conditions de fixation et de perméabilisation.

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