Anticorps monoclonal de lapin anti-PCSK9 humain pour cytométrie en flux - Q8NBP7

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de PCSK9

• PCSK9 est une proprotéine convertase de type subtilisine/kexine 9, également connue sous le nom de NARC-1, qui régule l’homéostasie du cholestérol plasmatique en se liant aux membres de la famille des récepteurs des LDL et en favorisant leur dégradation. Références associées : PMID:18039658
• Elle agit par un mécanisme non protéolytique pour renforcer la dégradation hépatique du LDLR via une voie médiée par la clathrine, en dirigeant potentiellement le LDLR vers les lysosomes. Références associées : PMID:17461796, PMID:18197702, PMID:18799458
• PCSK9 inhibe également la dégradation d’APOB via la voie autophagosome/lysosome et régule l’élimination de BACE1. Références associées : PMID:18660751
• Elle module l’apoptose neuronale en modifiant les niveaux de LRP8/APOER2 et inhibe l’absorption de Na+ médiée par l’ENaC en réduisant l’expression de surface de l’ENaC.
• Elle se localise dans le cytoplasme, est sécrétée et se trouve dans les endosomes, les lysosomes, la surface cellulaire, le réticulum endoplasmique et l’appareil de Golgi.
• Synthétisée sous forme de zymogène, PCSK9 subit un clivage autocatalytique ; les modifications post-traductionnelles ultérieures comprennent la glycosylation, la phosphorylation, la sulfatation et la formation de ponts disulfure.
• Une expression tissulaire est rapportée dans les neuro-épithéliomes, les carcinomes du côlon, les lignées cellulaires hépatiques et pancréatiques ainsi que les cellules de Schwann.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• Cet anticorps est conçu pour la cytométrie en flux intracellulaire ; par conséquent, les cellules doivent être fixées et perméabilisées avant la coloration. Optimisez votre protocole de fixation/per מעabilisation pour le type cellulaire cible.
• L’immunogène (aa 31–692 du PCSK9 humain) englobe le prodomaine et le domaine catalytique ; l’anticorps peut donc détecter les formes complète et clivée de PCSK9. Validez la détection dans le contexte biologique pertinent.
• En tant qu’anticorps directement conjugué, aucun anticorps secondaire n’est nécessaire, ce qui simplifie la procédure de coloration et réduit le bruit de fond.
• Titrez l’anticorps dans votre essai afin de déterminer la concentration optimale ; une plage de départ typique pour les anticorps conjugués en cytométrie en flux est de 0,125 à 1 µg par million de cellules, mais celle-ci doit être vérifiée empiriquement.
• Cet anticorps a été validé sur des échantillons humains ; la réactivité croisée avec d’autres espèces n’a pas été testée.
• Incluez les contrôles appropriés (contrôle isot ype, échantillon non stimulé) et envisagez de confirmer la spécificité par extinction génique avec des siARN ou par blocage avec du PCSK9 recombinant.

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