Anticorps monoclonal lapin anti-humain NT5E/CD73 pour CF - P21589

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de NT5E/CD73

• NT5E/CD73 est une ecto-5'-nucléotidase qui catalyse l'hydrolyse de l'AMP en adénosine, jouant un rôle clé dans la signalisation purinergique et la production d'adénosine.
• Elle présente une spécificité de substrat pour les monophosphates de ribonucléotides par rapport aux formes désoxyribose, avec une activité contre l'IMP, l'UMP, le GMP, le CMP, le dAMP, le dCMP, le dTMP, le NAD et le NMN. Références associées : PMID:21933152, PMID:22997138, PMID:23142347, PMID:34403084
• Elle est ancrée à la surface cellulaire via un fragment GPI, et se localise exclusivement sur la membrane cellulaire.
• Le site actif nécessite la liaison au zinc, et la protéine forme des ponts disulfures importants pour la stabilité structurelle.
• Plusieurs isoformes sont produites par épissage alternatif, ce qui peut moduler l'activité enzymatique ou la localisation.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la glycosylation liée à l'N, qui peut affecter le repliement et la fonction de la protéine.
• Des variants génétiques de NT5E sont associés à la calcification des articulations et des artères (CALJA) et d'autres pathologies, comme l'indique le mot-clé « Variant pathologique ».

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène est une protéine de fusion recombinante contenant les acides aminés 27–547 de NT5E/CD73 humain, correspondant à l'ensemble du domaine extracellulaire. Cette conception cible l'épitope natif exposé à la surface cellulaire.
• Pour la cytométrie en flux (CF), titrez l'anticorps pour déterminer la dilution optimale adaptée à votre type cellulaire et votre protocole de coloration. Incluez un contrôle isotype et, si possible, une lignée cellulaire de contrôle positif connue pour exprimer CD73.
• Étant donné que CD73 est ancré par GPI, tenez compte de la possibilité de clivage et de libération dans le surnageant dans certaines conditions ; incluez des contrôles appropriés pour garantir une coloration de surface spécifique.
• Comme cet anticorps est directement conjugué à l', il élimine le besoin d'un anticorps secondaire, ce qui simplifie le protocole et réduit le bruit de fond.
• Comme pour tout anticorps, une validation dans le contexte biologique concerné est recommandée, en particulier lors de l'étude de populations cellulaires rares ou de niveaux d'expression faibles.

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