Anticorps monoclonal anti-Nectine-4 humain de lapin pour cytométrie en flux - Q96NY8

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la Nectine-4

• La Nectine-4, également appelée PVRL4, LNIR et PRR4, est un récepteur de la superfamille des immunoglobulines codé par le gène NECTIN4 chez l'homme (ID génique 81607).
• Elle agit comme molécule d'adhésion cellulaire par des interactions trans-homophiles et hétérophiles, interagissant spécifiquement avec NECTIN1, et ne sert pas de récepteur pour l'entrée des alpha-herpèsvirus.
• La Nectine-4 est un membre de la famille des nectines, qui comporte quatre membres (nectine-1 à -4), tous contenant trois domaines immunoglobulines extracellulaires, un seul domaine transmembranaire et une queue cytoplasmique.
• Au niveau sous-cellulaire, la Nectine-4 se localise sur la membrane cellulaire et au niveau des jonctions cellulaires comme les jonctions d'adhérence, et une forme soluble sécrétée a été détectée.
• Les modifications post-traductionnelles incluent la glycosylation et la formation de ponts disulfures, qui contribuent à sa stabilité structurelle et à sa fonction.
• La Nectine-4 est majoritairement exprimée dans le placenta, et bien qu'elle ne soit pas détectée dans l'épithélium mammaire normal, elle est exprimée dans les carcinomes mammaires, ce qui indique un rôle dans la biologie tumorale.
• Fait important, la Nectine-4 agit comme récepteur cellulaire pour le virus de la rougeole, facilitant l'entrée virale dans les cellules hôtes.
• La protéine a un poids moléculaire calculé d'environ 55 kDa, avec des isoformes potentielles (par exemple 24 kDa) dues à l'épissage alternatif.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène correspond à la région extracellulaire N-terminale (acides aminés 32–146), qui inclut le premier domaine de type Ig critique pour les interactions avec les récepteurs ; cette conception cible probablement des épitopes exposés à la surface, ce qui la rend adaptée à la détection par cytométrie en flux de la Nectine-4 native sur cellules vivantes.
• Comme l'anticorps est directement conjugué à l', aucun anticorps secondaire n'est nécessaire, ce qui minimise la liaison non spécifique et simplifie le protocole de coloration pour la cytométrie en flux.
• Pour des performances optimales, déterminez par titrage la concentration d'anticorps adaptée à votre lignée cellulaire et votre expérience spécifique ; envisagez de tester des dilutions à partir de 1:20–1:100 pour 1×10⁶ cellules, mais la dilution optimale doit être déterminée expérimentalement.
• Compte tenu de la spécificité tissulaire rapportée (placenta, carcinome mammaire) et de la localisation sous-cellulaire (membrane et forme sécrétée), incluez des contrôles positifs appropriés tels que du tissu placentaire, des lignées cellulaires de carcinome mammaire (par exemple MCF-7, T47D), et des contrôles négatifs (épithélium mammaire normal ou modèles knock-out/knock-down) pour valider la spécificité de la coloration.
• Comme la Nectine-4 peut être libérée sous forme soluble, dans certains contextes expérimentaux (par exemple surnageant ou sérum), l'anticorps peut détecter la Nectine-4 soluble ; prenez cela en compte lors de l'analyse des données de cytométrie en flux issues d'échantillons dérivés de surnageants de culture cellulaire.
• Pour la recherche sur le virus de la rougeole, cet anticorps peut être utilisé pour évaluer l'expression de Nectine-4 dans les études d'interaction virus-hôte ; cependant, assurez-vous que l'épitope n'est pas masqué lors de la liaison virale ou de l'entrée cellulaire.
• Les bandes de poids moléculaire rapportées (24 kDa et 55 kDa) correspondent à des isoformes alternatives ; lors de la validation orthogonale (par exemple par Western blot), ces tailles peuvent être observées en conditions réductrices.

CamelBio : votre pont d'approvisionnement tout-en-un

CamelBio fournit aux fabricants de diagnostics, aux laboratoires et aux instituts de recherche un accès tout-en-un aux matières premières pour le diagnostic in vitro, notamment des paires d'anticorps validées, des anticorps monoclonaux/polyclonaux optimisés, des réactifs auxiliaires en vrac et l'approvisionnement en matières premières pour cibles rares. Pour la recherche sur la Nectine-4 dans les applications oncologiques et infectieuses, CamelBio peut fournir des réactifs complémentaires et des services de développement sur mesure pour accélérer votre développement d'analyses, du concept à la clinique.