PolymAb® de lapin anti-KLRG1 humain pour la cytométrie en flux - Q96E93

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de KLRG1

• KLRG1 (récepteur de type lectine des cellules tueuses, sous-famille G, membre 1) est une glycoprotéine transmembranaire de type II appartenant à la superfamille des lectines de type C ; il est également connu sous les noms de MAFA, CLEC15A ou MAFA-L.
• Cette protéine agit comme un récepteur inhibiteur sur les cellules tueuses naturelles (NK) et les lymphocytes T, principalement les lymphocytes T CD8+, et régule négativement leurs fonctions effectrices lors de la liaison à son ligand.
• KLRG1 reconnaît des cadhérines classiques telles que l’E-cadhérine (CDH1), la N-cadhérine (CDH2) et la R-cadhérine (CDH4), et cette interaction est supposée contribuer à la reconnaissance du « soi manquant », en détectant l’intégrité des tissus exprimant des cadhérines.
• Le récepteur contient un motif inhibiteur basé sur la tyrosine des immunorécepteurs (ITIM) dans son domaine cytoplasmique, qui assure la transmission des signaux inhibiteurs.
• KLRG1 est exprimé spécifiquement sur les cellules NK et les lymphocytes T, avec une expression prédominante sur les sous-populations de lymphocytes T CD8+ ; il est souvent utilisé comme marqueur des lymphocytes T en différenciation terminale ou sénescents.
• Au niveau subcellulaire, KLRG1 se localise sur la membrane cellulaire par l’intermédiaire d’un domaine transmembranaire signal-ancre.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la glycosylation liée à l’azote et la formation de ponts disulfure, caractéristiques de son domaine extracellulaire de type lectine C. Un épissage alternatif a également été rapporté.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène utilisé correspond aux acides aminés 60-195 du KLRG1 humain, englobant le domaine extracellulaire ; la protéine de fusion recombinante induit des anticorps spécifiques de la conformation native en cytométrie en flux.
• Cet anticorps est conjugué à l’, un fluorophore rouge lointain brillant, idéal pour les panels de cytométrie en flux multiparamétrique ; il est recommandé de titrer l’anticorps afin d’optimiser l’indice de coloration et de minimiser le bruit de fond.
• Compte tenu de son expression restreinte aux sous-populations de cellules NK et de lymphocytes T, il convient de valider les performances de l’anticorps dans le système d’échantillons pertinent (par exemple, des PBMC humaines) et d’inclure des contrôles isotopiques appropriés ainsi qu’un blocage des récepteurs Fc afin de garantir la spécificité.
• Il convient de noter que le poids moléculaire prédit est de 22 kDa ; toutefois, en raison de la glycosylation, la bande peut apparaître à un poids moléculaire plus élevé en western blot, si cette technique est utilisée.

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